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综合实验题二激动素对叶片的保绿效应
综合实验二 激动素对叶片的保绿效应 及对离体叶片中SOD活性的影响 实验原理 植物衰老机理假说:基因调控假说、激素平衡假说、氧自由基损伤假说和营养胁迫假说. 植物体中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ECl.15.1.1简称SOD）. + H2O2+O2 2H2O2 2H2O+O2 核黄素 还原的核黄素 硝基四唑蓝(NBT) + 甲腙 植物材料 小麦叶片 实验步骤 1.酶的提取： 将处理过的叶片吸干表面水分，分别称取0.5g，置预冷的研钵中，加入5mL预冷的提取介质(分几次加入)，研磨成匀浆，4℃15000×g离心10min，上清液即是酶提取液。将上清液倒入另一试管中，冰浴保存备用。 2.酶活性测定 3.结果计算和分析 ?A×N×60 酶活力=----------------------------- AO×W×T×0.01×50% 酶活力单位（U）：每h每g鲜重的酶活单位数；一个酶活单位定义为将硝基四唑蓝的还原抑制到对照一半（50%）时所需的酶量。 Ao：5号试管溶液在560nm处的吸光度; ?A：5号试管溶液在560nm处的吸光度值与加入酶液的 反应液在560nm处的吸光值的差； N：提取酶液的总体积（ml）； W：植物材料的鲜重（g）； T：照光时间（10min）； 0.01：加入酶液的体积(ml)； 60：60min（要计算1h的酶活力）。 思考题 实验材料可以用大豆叶片吗? 在细胞衰老过程中细胞结构和代谢上会发生哪些变化? 激动素延缓衰老的可能机理是什么? 对植物生理学实验课的意见和建议? 谈一下综合实验一的开设对理论知识的学习及实验技能的提高有何意义? * * 细胞分裂素 延缓叶片的衰老 SOD等消除了活性氧的毒害作用 维持SOD酶活 光 氧 过氧化氢酶 SOD SOD *
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