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关于寄生蜂触角的扫描电镜样品制备技术分析 摘要：寄生蜂有着比较小的体形，产卵多寄生在其它昆虫的幼虫或卵中；针对其触角感觉器而言，在寄生行为及寻找生境方面，发挥着关键性作用。扫描电镜样品制备技术是一种时下比较先进的制备技术，现今已在多领域中得到广泛应用。本文以蝶蛹金小蜂为例，就寄生蜂扫描电镜样品制备当中的所运用的一些方法作一探讨。 关键词：寄生蜂；触角；扫描电镜 寄生蜂是一种体形比较小的蜂类，当前，已经出现许多寄生蜂触角感觉器超微结构的报道。本文以菜蚜茧蜂、烟蚜茧蜂、野蚕黑卵蜂等寄生蜂为对象，对其触角开展电镜扫描，对其触角感觉器的分布情况、种类及雌雄之间所存在的差异进行研究。因寄生蜂的触角比较小，较难实施解剖取样，且各类感觉器在触角各节表面有着不同的分布，要想进行全面观察，且对其数量进行准确统计，须在粘台与取样时，将暴露触角的腹面、背面及两侧面的感觉器考虑在内；另外，在进行扫描观察时，需从多角度寻找，从中将生于凹陷内，或者是没有充分突出表皮的感觉器找出来。 1.资料与方法 1.1供试寄生蜂 采集菜粉蝶蛹（已被蝶蛹金小蜂寄生过），将其均装至专门的指形玻管当中，并置于光照培养箱中进行培育；当出蜂之后，按照1：2的比例，把雌雄蜂转入到事先准备好的大玻管当中，喂蜂蜜水（浓度为20%），并在培养箱当中任由其交配与取食；待2d后，让其寄生在指定的菜粉蝶蛹，待出蜂之后，用电镜对雌、雄蜂进行细致观察。 1.2取样与粘台 分别取若干雄成虫与雌成虫，于解剖镜直视下，用镊子将其头部连同其触角一同摘掉，用导电胶以正面与侧面的姿态粘在样品台上，用作触角整体着生状态的观察，此外，还用作观察梗节基部及柄节的刺形感觉器；于解剖镜作用下，利用镊子将其触角摘掉，分别以腹面、背面及两侧面作为观察面，将其站在扫描电镜的专用样品台上，主要用作棒节表面以及索节、小环节的感觉器的观察；在此操作中，可根据实际需要，用导电胶带纸进行粘样操作；针对触角索节而言，其主要由多个亚节构成，在其表面上，有着丰富的板状感器，除此之外，还有大量的毛形化学感器，除设置上述观察面之外，还需根据实际情况，截断亚节，并将之竖起；将横断面作为观察视角，对亚节上各种感觉器的实际排布规律进行细致观察；通过观察触角的顶端，得知其棒节实为一膨大分节的结构，而且在其端部还有一个“探索区”，分布着许多感觉器，同样需要分别从4个面上进行观察。需要指出的是，针对全部观察面，均需处于无污染状态，保持其干净且无损伤，如果是已经存放多年的针插标本，在其表面上，通常会布满菌，针对此情况，需要先用乙醇对其表面进行清洗，但整体效果不理想。 1.3表面镀金 当将样品粘台之后，利用离子溅射仪，将样本镀金，因触角被划分成若干节，并且在各个节的连接位置处，会有比较大的缝隙形成，容易出现金属导电层不通常或不连续的情况，当采用电镜进行观察时，存在比较严重的充电现象，对于此情况，需根据实际情况，增加镀层的厚度。在镀金操作时，如果选用真空喷镀仪行此操作，会有比较差的均匀性，因而不易将其当做触角样品。 1.4使用放电防止液 为了能够将触角表面金属镀层所存在的不连续问题较好的解决掉，可选用一种专用于扫描电镜的放电防止液，将触角粘在观察台上后，将一滴放电防止液滴在上面，然后让其自然变干，然后再进行镀金。如果经细致观察，发现触角存在充电现象时，则取样品，将放电防止液滴在上面，然后上机并进行细致观察，这样能够避免因导电不良所造成的充电效应。 1.5选择合适的扫描电镜观察条件 在扫描电镜下，对样品进行观察；因大多数感觉器均呈现为毛形，有着比较明显的尖端效应，当对电镜进行加速时，电压不能太高，通常情况下，以5～20kV最为合宜；有些感觉器的数量并不多，而且形状也比较小，非常容易出现被掩盖的情况，对此，应从各角度进行细致观察与寻找；在测量感觉器的直径与长度时，需使观察物始终处于与视线平行状态，如果存在一定角度，那么会导致数据出现偏差。 2.结果 触角呈现为膝状，在头部颜面的中部着生，主要由棒节、小环节、柄节、触角基、索节及梗节等构成，还需要指出的是，柄节与触角基处于同一节上。针对雌蜂来讲，其触角的长度为1.52mm，形状多为球形，着生于臼形触角窝中，柄节的直径为44?m，长度为435?m，而对于梗节来讲，其直径为60?m，总长度为115?m；无论是梗节还是柄节，其表米昂均呈现为典型的鳞片状纹。而对于小环节，主要有2节，每节的长度均相同，即均为20?m，直径也相同，即50?m。索节由若干亚节构成，针对第1亚节来讲，其相比于其它节稍长，其它亚节的长度均为125?m，而直径均为82?m。对于棒节而言，其长度为245?m，由4个亚节组成。相比于雌蜂，雄蜂的触角要相对较短，但二者在形状上基本相同。通过观察触角表面，共找出如下感觉器：板状感器、刺形感器、厚壁化学感器及薄壁