专题三课题2月季石的花药培养绝对经典.pptVIP

* 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 * 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 课题2 月季的花药培养 单倍体育种 花药 AB Ab aB ab 离体培养 二倍体植物AaBb 单倍体幼苗 AB Ab aB ab 秋水仙素 纯合二倍体 AABB Aabb aaBB aabb 特点：明显缩短育种年限 花药离体培养：花药 单倍体幼苗 单倍体育种：花药 单倍体幼苗 纯合二倍体 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 雄蕊 一、被子植物的花粉发育 被子植物花粉的发育过程 四分体时期 单核居中期 单核靠边期 双核期 减数 分裂 四分体时期 有丝 分裂 营养细胞 2个精子 有丝分裂 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 4个小孢子 减数分裂 1个小 孢子 花粉粒 （双核） 有丝分裂 花粉管细胞核 营养细胞 生殖细胞核 2个精子 1小孢子母细胞 4小孢子 花粉囊 花药 4花粉粒（双核期） 成熟花粉 8个精子 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 1花粉母细胞 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期 （二）产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似 这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及浓度配比。 胚状体 ——在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似； 神奇的人工种子 :通过胚状体途径形成小植株 烟草花药培养 胚状体发育途径 愈伤组织转接种到再生培养基 愈伤组织分化形成再生植株 水稻花药培养 愈伤组织发育途径 部分花药产生愈伤组织 接种在平板上的水稻花药 胚状体：离体培养的某些体细胞在形态上转变为与合子 发育成的胚非常相似的结构，胚芽，胚轴，胚根等结构 完整，就像一颗种子，这种结构叫体细胞胚，或胚状体。 愈伤组织：离体的组织细胞经过细胞分裂，形成的排列 疏松无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 不同植物的诱导成功率很不相同，就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 ②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。 选材是否成功是花药培养成功的关键。 ①选材 三、影响花药培养的因素 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。 选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药。 ③花药培养时期的选择 ④其它时期选择的缺点 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花，都不宜选作实验材料。 ⑥选择完全未开放花蕾的原因 完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒 ⑤单核期花药的挑选 ⑦为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 ⑦花药培养时间 一般月季的花药培养时间选在5月初到5月的中旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好，可提高花粉的诱导成功率。 2、培养基的组成 （ MS培养基+不同比例的植物生长调节激素） （一）材料选取 从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的 四、实验操作 1.我们怎样选择想要的花粉呢？ 镜检 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色) 焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。 花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色） 花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上