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生物选修3 核心知识必背
、基因工程的工具是:限制酶、DNA连接酶、运载体,工具酶是:限制酶、DNA连接酶
、运载体有质粒、动植物病毒、入噬菌体的衍生物。最常用的是质粒。
、基因工程的步骤是:目的基因的获取、基因表达载体的构建(核心步骤)、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
、获取目的基因的方法:从生物体内直接提取,人工合成,从基因文库中提取
、PCR中文名称是多聚酶链式反应。利用的原理是DNA双链复制原理。利用的酶是热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。
、基因表达载体最基本的四个结构是目的基因、标记基因、启动子、终止子
、标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。
、将目的基因导入植物用农杆菌转化法、基因枪法;动物细胞用显微注射法、微生物细胞用感受态细胞法
、检测目的基因是否插入染色体DNA用DNA分子杂交技术、检测目的基因是否转录出mRNA用分子杂交技术、检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原-抗体杂交法
、除了分子检测外,有时还需要时行个体性状的检测鉴定,例如抗虫接种实验
、目的基因的受体细胞通常用微生物的原因是,繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
、蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程,操作对象是基因
、植物体细胞杂交的结果是:获得杂种植株。
、制备原生质体的方法是用到纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
、植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
、植物体细胞杂交育种的优点是克服远缘杂交不亲和障碍
、促进原生质体融合的方法,物理法:离心、振动、电激。化学法:用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
、融合完成的标志是新细胞壁的形成
、大量生产细胞产物(紫草素、人参皂苷、紫杉醇)培养到愈伤组织,人工种子培养到胚状体或者是幼芽阶段。
、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理(消化)动物组织成为单细胞。
动物细胞培养的条件①无菌无毒的环境 ②营养 ③温度和PH ④气体环境
、动物细胞培养的培养基中需加入血清、血浆等天然成分。
、动物细胞培养中的CO2的主要作用是维持培养液的PH。
、核移植的受体细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞,
、动物细胞融合最主要的用途是生产单克隆抗体
、动物细胞融合中促进融合可以用物理法(离心、振动、电激)和化学法(聚乙二醇),特有的是还可以用灭活的病毒。
、单克隆抗体制备流程中,两次筛选的方法和目的分别是:第一次筛选是用选择性培养基筛选,目的是筛选出杂交瘤细胞;第二次筛选是用专一抗体检测(抗原抗体杂交法),目的是筛选出能够产生所需专一抗体的杂交瘤细胞。
、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体
、单克隆抗体最主要的优点是:特异性强、灵明度高,并可大量制备
精子的变形:细胞核变成精子头的主要部分;高尔基体发育成头部的顶体;中心体演变成精子的尾;线粒体集中在尾的基部形成线粒体鞘;细胞内的其他物质浓缩为球状,叫做原生质滴,最后脱落。
精子和卵子在发生上的重要区别:卵泡的形成和在卵巢内的储备,是在出生前完成的。
过程:(1)受精前的准备阶段1:精子获能:场所:雌性动物的生殖道(子宫和输卵管)
(2)受精前的准备阶段2:卵子的准备:发育到减数第二次分裂中期
(3)受精阶段:
a.精子穿越放射冠:顶体反应(顶体酶)
b.精子穿越透明带:透明带反应(阻止多精入卵的第一道屏障)
c.进入卵黄膜:卵黄膜封闭作用(阻止多精入卵的第二道屏障)
d. 雌、雄原核形成(雄原核的体积略大于雌原核)
e. 雌雄原核融合
受精的标志:在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时
二、哺乳动物胚胎发育过程
动物胚胎发育的基本过程:受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚
卵裂期:进行有丝分裂,细胞数量增加,胚胎总体积不增加,每个细胞体积减小,有机物总量减少。
桑椹胚:每一个细胞都具有全能性
囊胚:细胞开始分化的时期,分化出滋养层、内细胞团
原肠胚:继续分化
胚胎移植技术生理学基础:
①供体和受体具有相同的生理环境
②早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能
③受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥
④供体胚胎与受体子宫建立正常的生理和组织联系,且移入受体的胚胎的遗传物质不会改变
注:冲卵指从子宫中冲出早期胚胎
超数排卵、同期发情常用激素:促性腺激素。
4、胚胎分割技术,属于无性生殖。注意事项:①对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将内细胞团均等分割。
由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。简称ES或EK细胞。特点:具有发育的全能性
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