食用菌栽培相关木霉的调查和分析-微生物学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立 独创性声明 本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立 完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中 已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我～ 同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被 查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位(毕业)论文作者亲笔签名：累V兹岔 日期：劲阳8钐、彩 ， 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学 校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部 分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 口 不保密，本论文属于不保密。 口 学位(毕业)论文作者亲笔签名：壤r髦会纸。犷乜、 日期：∥艿．多。，多 指导教师亲笔签名： 日期：删．莎 中文摘要从木霉污染的食用菌菌筒和子实体中分离纯化了49株木霉菌株。采用形态学方法以及 中文摘要 从木霉污染的食用菌菌筒和子实体中分离纯化了49株木霉菌株。采用形态学方法以及 ITs／5．8S测序分析，对这些木霉进行了分类鉴定。结果表明，中国福建、浙江等省食用菌栽 培相关木霉以哈茨木霉(Trichoderma harzianum)和长枝木霉(Z longibrachiatu四)为主， 少量为深绿木霉(L atroviride)和棘孢木霉(f asperellum)；木霉的种类与采集地点、 受污染食用菌的种类有一定相关，如在浙江庆元香菇菌筒中分离的木霉主要是哈茨木霉，在 广州刺芹侧耳(杏孢菇)菌筒中分离的木霉主要是棘孢木霉，而从福建浦城香菇菌筒中分离 的木霉主要是深绿木霉。 哈茨木霉、长枝木霉、深绿木霉和棘孢木霉的ITS总长分别为：575 bp一578 bp、579 bp 一583 bp、565 bp一567 bp、和560 bp一561 bp，GC含量分别为：55．6％-56．7％、57．2％-58％、 55．6％-56．1％和55．8％-55．9％，充分体现了木霉属ITS的长度多态性；ITSl序列总长分别为： 221bp-233bp、248 bp-255 bp、214 bp-216 bp和213 bp-214 bp，GC含量分别为：55．40／o-57．4％、 57．50／o-58．7％、55．40／o-55．6％和55．60／o-55．9％；ITS2序列总长分别为：185bp-188 bp、168 bp-183 bp、189 bp一192 bp和188 bp，GC含量分别为：63．10／o-65．6％、66．1／o-67．9％、62．90／o-64．7％和 63．8％；所有木霉5．8S完全相同，总长为：159 bp，GC含量为：46．5％。ITS序列最适合用作 分类鉴定标记，ITSl不适合用作长枝木霉的分类鉴定，ITS2则种间差异较小的木霉不能得到 很好的区分。 不同菌株的木霉其RAPD条带，生长最适温度、pH值、培养基含水量都有所不同，显示了 食用菌栽培相关木霉具有多样性。木霉对5种食用菌栽培常用消毒剂敏感性测定，显示在同 等条件下多菌灵和甲基托布津对木霉抑制效果最好，百菌清效果次之，之后是大生，甲霜灵 不太适宜在食用菌栽培中当作防霉剂使用。 本文还研究了49株木霉对食用菌菌丝的侵染能力，发现不同木霉的侵染能力不同，同时 还发现，对食用菌侵染能力强的木霉对植物病原真菌的侵染能力并不一定强，表现出木霉对 真菌侵染的特异性。本文还探讨了木霉侵染食用菌的机理，结果显示，木霉可通过溶壁、缠 绕等方式作用于食用菌菌丝细胞壁，木霉发酵液对食用菌和植物病原菌都有很好的抑制作用。 木霉几丁质酶活性与侵染性没有直接关联：木霉侵染性强的菌株几丁质酶活性不一定高，产 酶活性高的菌株侵染能并不一定强。 几丁质酶活性、几丁质酶基因序列及氨基酸序列均与木霉的种类无关，如：同为深绿木霉 的66和69，几丁质酶活性分别为：0．0204U／mL．min和0．0044U／mL．min，前者约是后者的5 倍；不同种类的木霉可以有相似的几丁质酶序列。几丁质酶活性与侵染性无关，如木霉52无 倍；不同种类的木霉可以有相似的几丁质酶序列。几丁质酶活性与侵染性无关，如木霉52无 论在植物病原菌还是在食用菌中侵染性都很强，但其几丁质酶活性最弱。木霉几丁质酶基因 序列和氨基酸序列与侵染性有一定关系，侵染性强的棘孢木霉29和深绿木霉52同为一类； 侵染能力弱的棘孢木霉30和长枝木霉33同聚一类；侵染能力中的哈茨木霉45单独聚为～类； 深绿木霉66侵染能力强也单独聚为一类。木霉纤维素酶活性与侵染性没有直接关联。