初始pH值对圆红冬孢酵母菌油脂发酵影响资料.pdfVIP

第二届中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集 2007．07．15．18威海 初始pH值对圆红冬孢酵母菌油脂发酵的影响 李永红1’2刘波1赵宗保h白凤武。2 1中科院大连化学物理研究所生物技术研究部大连116023 2大连理工大学生物科学与工程系大连116023 摘要：以圆红冬孢酵母菌Y4为试验菌株，通过液态发酵产油。研究表明，当培养基初始pH值在1．6—10．0 变化时，发酵过程各参数受到明显影响。pH值为9．O时，摇瓶发酵96h后菌体生物量为18．8g／L，油 脂含量为53％(w／w)。采用碳酸钙控制培养基pH值，当加入2．25g／L碳酸钙时发酵终点pH值为5．7， 生物量达到了27．3g／L，油脂含量为59％(w／w)。在7L罐中将发酵过程pH值控制在5．7±O．2。发酵 结束时生物量为22．1g／L，油脂含量为54．3％(w／w)，油脂生成速率由O．17g／(Lh)(摇瓶发酵)提 高到了O．22g／(Lh)。初始pH值对胞内脂肪酸组成有一定的影响，但C。e和C。e系脂肪酸占油脂组成98％ 以上，可用于替代动植物油脂生产生物柴油。 toruloides 关键词：RhodosporldlumY4，微生物油脂，pH值 自然界中存在少数微生物在适宜条件下能将碳水化合物、碳氢化合物转化为油脂而 J。已知细菌、酵母、霉菌、 大量贮存，菌体油脂含量最高可超过其干重的70％(w／w)u 藻类中都有能积累油脂的菌株，但以酵母菌和霉菌类真核微生物居多【2】。利用微生物生 产油脂周期短，不受季节和气候的影响、营养简单，易于进行工业化大规模培养。近年 来，随着现代生物技术的发展，已获得更多具有高产油能力或其油脂组成中富含稀有脂 肪酸的产油微生物资源，提高了微生物产油的技术经济可行性13。5】。同时，在油脂积累 代谢调控的分子机制方面也取得了一些重要突破【6】。日本、德国、美国等国目前已有商 品菌油面市。更重要的是，随着化石资源贮量的日益减少导致全球范围能源供应形势日 趋严峻，利用基于碳水化合物的可再生资源，通过酶催化转化和微生物发酵来生产能源 产品和化学品，部分替代化石资源，将是可持续发展的必然。因此，利用微生物生产油 脂是开发新油脂资源的重要方向，进一步探索有关微生物积累油脂具有重要的现实意义 【7·9】 0 产油微生物油脂积累在培养基中某种营养成分消耗至一定程度时进行，通常是氮源 耗尽但碳源(通常是葡萄糖)丰富情况下，细胞不断吸收葡萄糖，并转化为甘油三酯 (TAG)。也就是说限制氮源供给会阻止细胞分裂繁殖，新合成的油脂储存在细胞体内，‘ 这样就可获得含油丰富的微生物有机体【lJ。pH值也是影响微生物生产油脂的因素。虽然 Enebo等【l o】建议培养过程pH值应保持恒定以减少pH值突然变化给发酵带来的影响， 但是一直没有相关文献表明pH值变化会直接影响到油脂合成。这表明pH值可能是影 2J将发酵培养的pH值设定在3．0和6．0时发现，较 提高到22％(w／w)；然而Kessell等【l IIP．30油脂积累 终点油脂产量相同。Johnson等ll列在考察pH值对Rhodotorula glutinis 的影响时却得出了与Kessell 02J不一致的结果，油脂含量在pH值4．0时达到最高66％ 5．O或6．0)及过低(pH3．0)均不利于油脂合成。这说明产生油 (w／w)，pH值过高(pH 脂的最适pH值依微生物种类而不同，应在具体培养过程中发现其规律。本文主要研究 toruloidesY4生产微生物油脂的影响。 了初始pH值对Rhodosporidium l材料与方法 1．1供试菌株 toruloidesy41141。 Rhodosporidium 1．2培养基及培养条件