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灵敏度100%; 特异性100%; 器官特异性; 与肿瘤的大小或分期有关; 与预后有关; 监测肿瘤的复发 AFP 甲胎蛋白 CEA 癌胚抗原 Ferritin 铁蛋白 CA12-5 肿瘤相关抗原CA12-5 CA19-9 肿瘤相关抗原CA19-9 CA153 肿瘤相关抗原CA153 CA72-4 肿瘤相关抗原CA724 CA242 肿瘤相关抗原CA242 CA50 肿瘤相关抗原CA50 CYFRA2101 细胞角蛋白19片段 NSE 神经元特意性烯醇化酶 PSA 前列腺特异抗原 fPSA 游离前列腺特异抗原 铁蛋白由人体网状内皮细胞分泌,人体内的2/3的铁在肝、脾、骨髓和肠黏膜细胞中,某些肿瘤细胞也可合成并释放铁蛋白。 管式化学发光免疫技术是理想的肿瘤标志物体外诊断技术 高灵敏性、特异性和稳定性 宽线性范围 使用范围广 高通量和高度自动化 无放射性危险 鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统 H2O2+ NH2 O O NH NH N2 OH- HRP NH2 CO2- CO2- +Photon (425nm) R OH R OH N S R B OH OH 增强剂(Enhancer) 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作辣根过氧化物酶的底物 鲁米诺化学发光系统 鲁米诺直接标记 :索林DiaSoin Liaison 新产业 HRP-鲁米诺标记:源德、科美、安图 金刚烷作为碱性磷酸酶的底物 + * 光子(477nm) AP O O OCH3 OPO32- O- O O OCH3 O O- O OCH3 金钢烷(发光底物)及其衍生物的增敏化学发光系统 碱性磷酸酶化学发光系统 碱性磷酸酶(AP)系统:贝克曼:Access 1、Access 2,DXI600、DXI800 西门子:Immulite1000 , Immulite 2000 达成生物:AULIA200 第一代:鲁米诺及其衍生物 第二代: 直接标记:吖叮酯标记 间接标记:碱性磷酸酶-金刚烷系统 电化学发光:三联砒啶钌 化学发光的发展史 国际主流免疫诊断公司均采用第二代化学发光标记物: 吖啶酯(雅培、碱性磷酸酶-金刚烷(贝克曼、西门子)、三联砒啶钌(罗氏) 化学发光检测方式 随机处理模式 管式化学发光 批处理模式 板式化学发光 采用管式或微粒子发光,测定快速、准确; 可以随到随测,适用于医院急诊; 定量检测的标准曲线存储在试剂条形码中,可在2-4周内直接使用。 国外厂家是管式化学发光系统 管式化学发光 适合流行病调查、疾病预防与控制、体检中心,以及医院血站等大样本检测项目的使用(比如HIV、TP、HCV和乙肝两对半等); 通常采用96孔白色不透明微孔板进行包被,不方便随到随测和医院急诊; 对于定量检测需要做标准曲线。 国内厂家主要是板式化学发光系统 板式化学发光 管式化学发光 vs 板式化学发光 管式化学发光 板式化学发光 检测方式 管式测量,非批量随机检测,标本随到随测,方便急诊 板式测量,批量检测。需要将样品收集集中检测,适合大样本量检测 抗体/抗原包被方式 包被磁微粒,包被量更大,有效避免Hook效应,提高检测灵敏度,缩短反应时间 包被微孔板,包被量有限 试剂盒变异系数(CV) Ab/Ag包被是通过化学共价耦合,试剂盒CV小 包被是通过非特异性吸附,试剂盒CV大 反应过程 磁微粒粒径小,比表面积大,免疫反应过程在近乎均相的条件下反应,反应更充分,更快速 免疫反应过程为固液相反应,反应不充分,速度较慢 读数干扰 检测管独立读数,不存在管间的读数干扰 微孔板整板读数,微孔间存在读数干扰 自动化 容易实现自动化,通常与专门的自动化检测仪配套使用 半自动化操作 结 论 二、肿瘤标志物的联合诊断 肿瘤标志物联合检测 同一肿瘤可含
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