蛋白质二硫键异构酶相关蛋白A的表达及性质的研究-微生物学报.PDFVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # %’ (! ) (# 年 月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+’, !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 蛋白质二硫键异构酶相关蛋白 的表达及性质的研究 ! 周海平 贾翠娟 张渝英 （中国科学院微生物研究所，北京 /3 ） 摘 要 克隆了 中的蛋白质二硫键异构酶相关蛋白 （ ）基因，并将它插入 表达载 34%*1#,,) $#1%* 1!/ @ ABA@ C51!-D 体。在 中表达时， 占菌体总蛋白的 。经过超声破细胞、硫酸铵分级沉淀和离子交换层析获得了 5 ( 0(,# ABA@ -# E 纯度大于0 E 的重组蛋白。ABA@ 有二硫键异构酶活性。在ABA@ 存在下，变性和还原的溶菌酶复性率和复性速度 降低，电泳结果表明溶菌酶聚集增多。荧光结果表明ABA@ 表面有较多的疏水基团。 关键词 蛋白质二硫键异构酶相关蛋白@，抗分子伴侣，蛋白质重折叠 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） FGG @ /.-4/ !# #.G0G.4 外源蛋白质基因在 5 ( 0(,# 中的大量表达常常 础。 会产生包涵体，包涵体中的蛋白质是没有生物活性 材料和方法 的，需要经过重折叠才能成为有活性的蛋白质。蛋 白质折叠一直是生物学研究热点之一，蛋白质序列 # 材料 中决定蛋白质折叠状态的信息被称为第二密码。在 34%*1#,,) $#1%* 1!/ 由中科院微生物所唐国敏 细胞内，由于蛋白质浓度很高，蛋白质折叠需要有折 教授惠赠，人蛋白质二硫键异构酶（ ）的表达质 :ALM 叠因子即折叠酶和分子伴侣（ ） 粒CT%!!.48# 由首都师范大学高音博士惠赠。 H’I72 7;I ?:7C2J;2 的帮助，折叠酶和分子伴侣在体外同样也能提高变 、 （ ）和 均由本实验室保存。试 LRG!TS!/ L5- C51!-D ［］ 性蛋白质的复性率/ 。蛋白质二硫键异构酶（ 剂主要来自 、 、 、 、 、 CJ. AJ627 U867 )5T U7;; @62J:76