氧化应激介导的自噬在镉诱导a549细胞增殖迁移和侵袭中作用机制的研究劳动卫生与环境卫生学专业论文.docxVIP

大连医科大学硕士学位论文目 大连医科大学硕士学位论文 目 录 一、摘要．．．．． ．．．． ．．．．．．．． ． ．．． ． ．．1 (一)中文摘要．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．． ．．． ．．1 (二)英文摘要． ． ．．．．． ． ．． ．．． ．．．．3 二、正文．． ． ．．．．．．．．．．． ． ．．．． ．． ．． ．6 (一)前言．．．．(一)日U舌．．．． ．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．6一．．．． (二)材料与方法 ．．． ．．．．．。．。． ．。 ． 8 1．实验材料． ． ．． ．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．． 8 2．实验方法．．．．．．．． ．．．．．．．．． ．．．． ．．．． ．．．．9 3．统计方法．．．．．．．．．．．．． ． ．．．．．．． ．1 5 (三)结果．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．16 1．氯化镉对A549细胞增殖的影响 ．．．．． ．．．．．．．．． 16 2．氯化镉对A549细胞白噬形成的影响 ．．．．．．．．．． ．．．17 3．氯化镉对A549细胞ROS水平的影响及其对氯化镉诱导细 胞增殖和自噬的影响 ．．．． ． ．．． ．． ． 20 4．At94在氯化镉诱导A549细胞白噬中的作用和白噬在氯化 镉诱导A549细胞增殖中的作用．．．．． ．．． ．．22 5．白噬在氯化镉诱导A549细胞周期变化中的作用．．．．．．．26 6．At94在氯化镉诱导A549细胞迁移和侵袭中的作用． ．30 (四)讨论 ．．． ．．．． ．．． ．．．． ．．．．． ．．．33 (五)结论．．．．．．． ．．．．．．．．． ．．．．． ．． ．．．．．．．．．36 (六)参考文献． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．37 万方数据 大连医科大学硕士学位论文三、综述 大连医科大学硕士学位论文 三、综述 ．．．．．．．．．． ．． ．． ．． ．．．．．．．41 (一)综述 ． ．．．． ． ． ．．．．．．．41 (二)参考文献．．．．．．．． ． ． ． ．．．．．．．．45 四、攻读学位期间发表文章情况 48 五、致谢 ．．49 万方数据 大连医科大学硕士学位论文一、摘要 大连医科大学硕士学位论文 一、摘要 氧化应激介导的自噬在镉诱导A549细胞 增殖、迁移和侵袭中作用机制的研究 硕士生姓名：谢华颖 指导教师： 曹军教授 专业名称： 劳动卫生与环境卫生学 (一)中文摘要 镉(Cadmium)是一种广泛应用于工农业生产的有毒重金属，随着近年来越 来越多有关镉污染的报道，人们也越来越关注镉对环境和人类的健康造成的影 响。镉能对多个器官系统造成巨大的危害，包括。肾、肝、脑、肺、睾丸及血液等。 流行病学研究和动物实验研究中明确了镉暴露与多种肿瘤有相关性，尤其是镉与 肺癌有明显的关联性，1993年IARC(国际肿瘤研究中心)将镉列为I类致癌物。 研究表明，许多癌症和肿瘤晚期的转移和恶化可能与肿瘤细胞白噬水平改变有 关。自噬通过包裹细胞质内的蛋白质和衰老细胞器形成具有双层膜结构的自噬小 体进行降解物质实现循环利用，这一过程受自噬相关蛋A(Atg)的逐级调节， 随后自噬体与溶酶体融合后消化膜内容物产生合成大分子和代谢物的物质，为细 胞提供能量来源。因此，本研究拟探讨低浓度镉诱导的白噬在镉诱导肿瘤发生中 的可能分子机制。 本研究拟以人肺腺癌A549细胞为体外实验模型，观察氯化镉对A549细胞 的细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力的影响；再通过观察细胞周期改变及Cyclin．D1 表达、细胞内活性氧水平，自噬形成及相关蛋白的表达、细胞迁移侵袭能力变化 及相关蛋白MMP．9蛋白表达，探讨可能的分子机制；并采用活性氧(ROS)的 清除剂N．乙酰半胱氨酸NAC和At94 siRNA干预处理，进一步明确ROS上调 At94引起的白噬在氯化镉诱导A549细胞的细胞增殖、细胞迁移和侵袭中的分子 万方数据 大连医科大学硕士学位论文机制，为镉诱导肿瘤提供预防和治疗的理论依据。 大连医科大学硕士学位论文 机制，为镉诱导肿瘤提供预防和治疗的理论依据。 目的：研究低浓度氯化镉对人肺腺癌A549细胞的增殖、细胞迁移和侵袭能 力的影响，并探讨依赖细胞内ROS的自噬途径在细胞增殖、细胞迁移和侵袭变 化过程中的作用机制。 方法：以人肺腺癌细胞(A549细胞)作为实验对象。按实验设计，将不同 浓度氯化镉作用于A549细胞，应用MTT法测定A54