台州市科技 计划项目可行性报告.doc

台州市科技计划项目可行性报告 一、立项的背景和意义 膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，在我国每年有约15万的膀胱癌新发病例，而且发病率呈逐年增高之势。90 %以上是移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma, TCC)，少数为鳞癌和腺癌。移行细胞癌患者中近30％初诊时已有肌层浸润，其余70％为浅表性膀胱癌；虽采用经尿道切除和膀胱腔内辅助治疗可获得良好效果，但复发率高达50％～70％，而且10％～15％的复发肿瘤侵及肌层，有时复发会在术后数年发生。因此，早期诊断和长期复查监测非常必要。 膀胱癌诊断和筛查的主要手段是膀胱镜下活检和尿细胞学检查。虽然膀胱镜是诊断尿路上皮癌的金标准，但是具有侵入性，且对于微小病变和原位癌不易辨认。尿脱落细胞病理学检查虽然无创伤，然而阳性率较低，尤其在检测低级别肿瘤时敏感度更低, 而且结果判断具有主观性，容易产生偏差。鉴于尿细胞学和膀胱镜检查存在的种种缺陷，尿液诊断膀胱癌一直是研究热点。 ?尿液荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization ,FISH)是用荧光标记的核酸探针和中期或间期细胞DNA杂交，检测尿液脱落细胞DNA 序列及其变化的方法。膀胱癌细胞易发生非随机的染色体改变，包括结构畸变和染色体数目异常，肿瘤细胞容易脱落于尿液中。这项技术使用患者的尿液或膀胱冲洗液检测肿瘤脱落细胞，更符合诊断的无创原则。国际报道该方法灵敏度高、适合膀胱癌的早期检测和复发监测。目前我省开展此项目的医疗单位较少，本研究将通过比较脱落细胞学和FISH两种方法在检测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的特异性、敏感性，完善FISH实验流程，阐明并开发其临床应用价值，为本地区膀胱癌检测提供更优方法。 二、国内外研究现状和发展趋势 膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤，在我国每年有约15万的膀胱癌新发病例，而且发病率呈逐年增高之势。由于全部尿路从肾盏、肾盂、输尿管、膀胱及前列腺和尿道均为移行上皮所覆盖，所以90 %以上是移行细胞癌(Transitional Cell Carcinoma, TCC)，少数为鳞癌和腺癌。移行细胞癌患者中近30％初诊时已有肌层浸润，其余70％为浅表性膀胱癌；虽采用经尿道切除和膀胱腔内辅助治疗可获得良好效果，但复发率高达50％～70％，而且10％～15％的复发肿瘤侵及肌层，有时复发会在术后数年发生。因此，早期诊断和长期复查监测非常必要。 膀胱癌诊断和筛查的主要手段是膀胱镜下活检和尿细胞学检查。虽然膀胱镜是诊断尿路上皮癌的金标准，但是具有侵入性，且对于微小病变和原位癌不易辨认。尿脱落细胞病理学检查虽然无创伤，然而阳性率较低，仅为8 %～46 %，尤其在检测低级别肿瘤时敏感度更低, 而且结果判断具有主观性，容易产生偏差。膀胱镜和细胞学方法易受BCG及其他化疗的影响，从而出现假阳性或假阴性结果。另外，感染、结石等亦可影响细胞的形态而造成假阳性。鉴于尿细胞学和膀胱镜检查存在的种种缺陷，尿液诊断膀胱癌一直是研究热点并取得了一定的成果。 ?荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization ,FISH)是用荧光标记的核酸探针和中期或间期细胞DNA杂交，检测DNA 序列及其变化的方法。具有快速、无创性、敏感度高和特异度强等优点。 膀胱癌细胞易发生非随机的染色体改变，包括结构畸变和染色体数目异常。常见结构畸变染色体有3、9、1、5、11 、21 、17 ，染色体数目异常有3、9、7、10 、11 、Y、1、8、17 、15 。临床研究发现9 号染色体部分或全部丢失在膀胱肿瘤中最常见，超过50 %膀胱癌患者有此染色体改变，被认为是肿瘤发生的早期事件和关键步骤；其次是17 号染色体畸变，可能与肿瘤浸润行为有关，因为有17号染色体非整倍体的肿瘤具有更高复发率和浸润性；7号染色体畸形也常见于膀胱癌，以三倍体多见，也可有四倍体(约占38 %)，它可以单独出现在膀胱癌，但更多是伴随其他染色体改变一起发生；3 号染色体异常在BTCC约占30 % ，而且常与其他染色体的异常并存，可以有染色体移位和数量变化，与复发有关。其他染色体异常有男性膀胱癌约半数患者被发现Y染色体丢失，11 号染色体单体等。 ? 细胞癌变的最早事件是DNA的改变。与膀胱镜和细胞学方法相比，FISH方法直接检测DNA水平的异常，所以能更早发现癌变。膀胱镜阴性FISH阳性的术后随访病例在3～12个月中有41％～68％被确诊为膀胱癌，而双阴性的情况下只有19％在3～19个月后确诊为膀胱癌。通过荧光原位杂交分析尿脱落细胞染色体3、7、17号非整倍体和染色体9p21丢失以诊断膀胱癌，据称能达到85％的敏感度和97％的特异度。这项技术是一种快速无创的检测技术，只需要使用患者的尿液或膀