干细胞移植对MCAO模型鼠脑组织miR-34a与Survivin表达的影响.pdfVIP

万方数据 干细胞移植对MCAO模型鼠脑组织miR-34a 及Survivin表达的影响 摘要： 目的：研究缺血再灌注损伤后大鼠脑组织miR-34a、Survivin的表 达水平，探讨BMSCs移植的抗凋亡和神经保护作用。 方法：1.构建模型：选取体重约250-300g左右的健康雄性SD大鼠， 采用改良Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebral artery occlusion, MCAO) 再灌注模型。2.成功模型的判定：5分制评分法评 分，1-3分的为造模成功模型，TTC染色验证脑组织梗死范围。3.实验 分组：符合实验纳入条件的大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、 PBS液移植组、干细胞移植组。干细胞移植组和PBS液移植组于造模 6 成功后分别通过尾静脉注射1ml （含有l ×l0 个）骨髓间充质干细胞和 1ml PBS液，B组造模后无特殊处理，A组不做处理。各组分别于造模 成功后12h、1d、3d、7d观察相关指标的变化。4.观测指标：改良大 鼠神经功能缺损评分（mNSS ）评估神经功能缺损；免疫组化检测 Survivin的表达；实时荧光定量PCR技术检测miR-34a的表达。 结果：1.根据5分制评分法评估，造模成功率为72.22% 。最终可 用于相关指标检测的实验动物成功率为54.17% 。2.神经功能缺损评分 显示：在12h、1d、3d、7d时间点，空白对照组：0 ±0.00 ；模型对照 组：9.83 ±2.04 、15.17±1.47、12.17±2.23 、10.83±1.47；PBS液移 植组：9.67 ±1.97、15.00±1.67、12.00±2.10 、11.00±2.37；干细胞 移植组：10.00±2.53 、13.33±2.16 、8.33 ±1.21、6.83 ±0.75 。模型组、 I 万方数据 PBS液移植组、干细胞移植组在各时间点均高于空白对照组（P0.01 ）； 模型组与PBS液移植组比较无明显差异（P0.05 ）；12h、1d时干细胞 移植组与模型组、PBS液移植组比较无明显差异（P0.05 ）；3d、7d 时干细胞移植组明显低于模型组和PBS液移植组（P0.05 ）。3.免疫 组化结果显示：Survivin阳性细胞率(%)在12h、1d、3d、7d时间点， 空白对照组：0 ±0.00 ；模型对照组：11.00±2.61 、19.17±3.76、31.00 ±3.03、13.00±2.61 ；PBS液移植组：10.67±2.16 、20.00 ±3.46、32.33 ±4.18 、14.33±3.14；干细胞移植组：16.33±2.16 、29.00 ±5.48、44.83 ±3.76、25.00 ±4.60 。模型组、PBS液移植组、干细胞移植组在各时 间点均明显高于空白对照组 （P0.01 ）；模型组与PBS液移植组无明 显差异（P0.05 ）；干细胞移植组在各时间点均显著高于模型组和PBS 液移植组（P0.05 ）。4.实时荧光定量PCR结果显示：miR-34a表达量 在12h、1d、3d、7d时间点，空白对照组：1.1187±0.1241 ；模型对照 组：4.7698 ±0.2569、3.7305 ±0.2985、3.0697 ±0.2067、2.6898 ±0.1998 ； PBS液移植组：4.7388 ±0.2147 、3.7705 ±0.2378 、2.9782 ±0.2153 、 2.6682 ±0.1879 ；干细胞移植组：4.0532 ±0.2082 、2.8338 ±0.2391 、