低剂量微囊藻毒素对原代大鼠肝脏细胞的促增殖效应及其初步机制分析营养与食品卫生学专业论文.docxVIP

复 复 旦 大 学 硕 士 学 位 论 文 低 剂 量 微 囊 藻 毒 素 对 原 代 大 鼠肝 脏 细 胞 的 促 增 殖 效 应 及 其 初 步 机 制 研 究 和 指 标 的 测 定 奠 定 了 基 础 。 通 过 染 毒 10 一，一10 一‘“m o l/L 梯 度 浓 度 的 M c 一L R ，观 察 其 在 较 长 染 毒 时 间 范 围 内 (2 4 h 一72 h ) 的 毒 性 作 用 特 征 ，发 现 M C 一L R 对 原 代 大 鼠肝 脏 细 胞 存 在 剂 量 依 赖 性 的 双 向 毒 性 作 用 ， 即 林M 级 别 的 M C 一L R 对 原 代 大 鼠 肝 脏 细 胞 具 有 细 胞 毒 性 作 用 ，表 现 为 细 胞 状 态 恶 化 、细 胞 活 率 显 著 下 降 、细 胞 凋 亡 率 明 显 上 升 ; 而 p M - nM 级 别 的 M C 一L R 具 有 促 进 细 胞 增 殖 效 应 ，表 见 为 细 胞 活 率 增 加 、细 胞 周 期 中 S 期 细 胞 比 例 增 加 ， D N A 合 成 速 率 增 加 。 进 一 步 对 M C 一L R 导 致 的 原 代 大 鼠肝 脏 细 胞 增 殖 效 应 进 行 研 究 ，发 现 M A P K 家 族 成 员 磷 酸 化 状 态 、 细 胞 内 R O S 含 量 以 及 抗 氧 化 系 统 均 与 这 一 效 应 有 关 。 具 体 表 现 为 : M A P K 家 族 的 磷 酸 化 状 态 与 低 剂 量 (10一9一10 一‘“m o l/L) M c 一L R 的 促 细 胞 增 殖 效 应 密 切 相 关 ，在 细 胞 增 殖 活 跃 的 时 间 (48 h 以 内) ， E R K I/2 的 磷 酸 化 活 性 显 著 增 加 ， 而 JN K I/2 和 p 38 的 磷 酸 化 活 性 受 到 了 明 显 的 抑 制 ; 10 一9一10 一12 m ol/L 浓 度 的 M C 一L R 染 毒 后 ，细 胞 内 R O S 水 平 出现 了 温 和 的 变 化 ，低 水 平 R O S 对 大 鼠肝 脏 细 胞 反 复 而 温 和 的 刺 激 与 M C 一L R 促 增 殖 效 应 的 时 间 区 间 (48 h 以 内 ) 存 在 很 大 的 重 叠 性 ， 且 与 细 胞 周 期 、 M A P K 结 果 相 一 致 。 关 键 词 : 微 囊 藻 毒 素 ; 细 胞 凋 亡 ; 细 胞 增 殖 ; 细 胞 周 期 ; 丝 裂 原 活 化 激 酶 ; 活 性 氧 中 图 分 类 号 : Q 5 03 ·1 3 复 旦 复 旦 大 学 硕 士 学 位 论 文 低 剂 量 微 囊 藻 毒 素 对 原 代 大 鼠肝 脏 细 胞 的 促 增 殖 效 应 及 其 初 步 机 制 研 究 S tu d y o f th e P r o life r a tiv e E ffe c t o f M ic r o e y s tin o n P r im a r y R a t H e P a to c y te s a n d th e P o s s ib le M e c h a n is m s I n v o lv e d A b s tr a C t In re e e n t y e a rs ，th e P h e n o m e n a o f a lg a l b lo o m s o e e u r f re q u e n tly w o r ld w id e ， b rin g in g ab o u t serio u s threat to h u m an h ealth .M iero cy stin (M C )，a elass o f b io lo g ical to x ie o n a n d m o n o e y e lie h e P ta p e P tid e e o m P o u n d ，15 P ro d u e e d b y b lu e 一g re e n a lg a e ， a n d m o re th a n 8 0 k in d s o f iso m e rs h a v e b e e n f o u n d . M C 15 sta b le a n d d if fi e u