实验五乳粉中乳糖的测定.doc

实验五：乳粉中乳糖的测定 一、 实验目的： 常握莱因一艾农氏法测定乳粉中乳糖的原理和方法。 二、 实验原理： 样品经除去蛋口质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样 液中的乳糖将费林氏液中的二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终 点稍过量吋，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据 样液消耗的体积，计算乳糖含量。 费林氏液由卬、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾 钠溶液。平时甲、乙液分别贮存，测定时才等体积混合，混合时，硫酸铜与氢氧 化钠反应，生成氢氧化铜沉淀： INaOH + CuSO4 = Cu（0H）2 J +Na2SO4 牛成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钾钠反血，牛心酒石酸钾钠与铜的络合物, 使氢氧化铜溶解：COOKCOOKHOH+ Cu(OH) 使氢氧化铜溶解： COOK COOK HOH + Cu(OH)2 HOH CHO Cu + 2H2O €H0 OONaCOONa OONa COONa 酒石酸钾钠铜络合物屮的二价铜是一个氧化剂,能使还原糖氧化，而二价 酒石酸钾钠铜络合物屮的二价铜是一个氧化剂, 能使还原糖氧化，而二价 铜被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀: COOKCHOCHCu + (CH0H)4 +2比。=2CH COOK CHO CH Cu + (CH0H)4 +2比。=2 CH CH2OH COONa COOK COOH CHOH + (CHOH)4+2Cu2Ol CHOH CH2OH COONa 反应终点用次甲基蓝指示剂显示。次甲基蓝是氧化能力较二价铜更弱的一种弱氧 化剂，故待二价铜全部被还原糖还原，过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原，溶 液的蓝色即消失。反应终点应为氧化亚铜的砖红色。 三、所用仪器及试剂药品： 1、 试剂 费林氏液： 甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水屮，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mLo 乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL,静置两 天后过滤。 次甲基蓝溶液:10g/Lo 盐酸溶液：体积比1： L 酚瞰溶液：0?5g酚駄溶于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20mL 水，然后再加入约0. Imol/L的氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色， 再加入水定容金lOOmLo 氢氧化钠溶液：c(Na0H)为300g/L。取300g氢氧化钠,溶于lOOOmL水中。 醋酸铅溶液：c(PbAc2)为200g/L。取20g醋酸铅,溶解于100mL水中。 草酸钾一磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g,磷酸氢二钠7g,溶解于100mL 水中。 2、 仪器 250mL三角瓶(蒸憎水洗净烘干) 酸式滴定管(0?50mL、O.lmL精确度) 250mL 100mL 容量瓶 5mL、50mL 移液管 电炉子 四、操作方法: (1)用乳糖标定费林氏液： 称取预先在92?94°C烘箱屮干燥2h的乳糖标样约0.75g (准确到0.2mg ), 用水溶解并稀释至250mLo将此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。 a)预滴定： 取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角瓶屮。再加入20mL蒸诸水，从滴定管中放岀15mL乳糖溶液于三角瓶屮，置于电炉上加热，使其在 2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s,加入3滴次甲基蓝溶液，继 续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。 b）精确滴定： 另取费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸 诸水，一次加入比预备滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使-其在 2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min,加入3滴次甲基蓝溶液， 然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此 滴定量作为计算的依据（在同吋测定蔗糖吋，此即为转化前滴定量）。 费林氏液的乳糖校正值（fi）： Kx“xlOOO250=4 Kx“xlOOO 250 =4 x % x (4-4-1) (4-4-2) 式中：Ai 实测乳糖数，mg； Vj——滴定时消耗乳糖液量，mL； mi——称取乳糖的质量，go AL】——由乳糖液滴定毫升数查表4?1?1所得的乳糖数，mgo （2）乳糖的测定 样品处理 a） 称取2.5?3g样品（准确至O.Olg）,用100mL水分数次溶解并洗入250mL 容量瓶屮。 b） 加4mL醋酸铅、4mL草酸钾一磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要 徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤纸过滤，弃 去最初25mL滤液后,所得滤液作滴定用。 滴定 a）预滴定：将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏 液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20m