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总胆红素测定SOPTBIL临床意义.doc
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1检测原理
重氮化对氨基苯磺酸由亚硝酸钠和对氨基苯磺酸在低PH值时结合而形成。样本屮的胆红素(肺结 核的)通过在咖啡因/苯甲酸盐/醐酸盐/EDTA的混合剂中稀释而溶解。在添加重氮化的对氨基苯磺酸吋, 增溶的胆红素,包括结合的胆红素(单和二葡萄糖甘酸)和delta形态(胆蛋白胆红素共价结合白蛋白) 都被转化为重氮胆红素,代表总胆红素的红色发色团在540nm处吸收,使用双波长(540, 700nm)终点 法测量。使用了空白校正。
溶解的胆红素+重氮化对氨基苯磺酸——? 红色发色团
(在540mn处吸收)
2标本采集与处理
1采血方法
空腹采不抗凝静脉血2~3ml。
2标本保存
室温保存,及时送检。室温下胆红素极不稳定,故应自收集样品后2h内完成检测,密封和避光条 件下,保存在2?8°C冷藏可稳定3天,-70°C暗处保存,稳定3个月。
3注意事项
使用新鲜血清或血浆,明显溶血对血淸TB1L测定有负干扰,脂浊时对血清TB1L测定有正干扰,建 议早晨空腹采血,以减少脂浊对测定的干扰。标本应避免脂血、溶血、黄疸。
3试剂和设备
1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
1. 1试剂组成
试剂船1, 4?6孔为咖啡因1 OOmmol/L,苯甲酸钠200 mmol/L, EDTA二钠盐1.5 mmol/L,缓冲液, 液体;2孔为对氨基苯磺酸3. 4mmol/L,盐酸17 mmol/L,液体;3孔为亚硝酸钠0.35 minol/Lo
1.2试剂准备
直接使用。
1.3试剂保存
试剂2~8C保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
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3.3校准品
西门子校准品。
4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。
4操作程序
1检测过程流程
签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。
2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
3标本处理
以2500?3000i7min,离心6~10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8°C保存。
4标本检测
4.4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter?在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需耍选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。
4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4. 4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Rim键,仪器开始进行 样品检测。
4. 4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
1校准品進备和储存
每瓶加2.0ml蒸馆水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。
2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。
3校准程序
主屏幕按 F5:PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-*F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最丿舌把校准液各个水
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平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样 品架上,按F7: LOAD/RUN-F4: RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10—70°C可保存到瓶身有效期,未开启2?8°C可保 存90d,开启后2~8°C可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。
3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
本法线性范围为0?428umol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀 释因子后再重新检测。
8生物参考区间
0 ?17.1umol/Lo
9临床意义
血清总胆红
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