《SNT1181.2-2003-口蹄疫病毒抗体检测方法微量血清中和试验》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1181.2-2003 口蹄疫病毒抗体检测方法 微量血清中和试验 Detectionantibodiesagainstfootandmouthdiseasevirus- Protocolofmicro-serum neutralizationtest 2003-03-17发布 2003-09-01实施 中 华 人 民 共 和 匡 国家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 肩 SN/T1181.2-2003 曰出. ..吝~ 月g 青 本标准根据采用OIE《诊断试验与疫苗标准手册》2000年第四版2.1.1章的相关内容起草。 本标准的附录A、附录B是标准的资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:杨素、薛景山、吕宏、冯家望。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T 1181.2-2003 口蹄疫病毒抗体检测方法 微量血清中和试验 范围 本标准规定了口蹄疫病毒微量血清中和试验方法。 本标准适用于口蹄疫病毒中和抗体水平的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是往日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682-1992 分《析实验室用水规格及试验方法》 3 缩 略语 下列缩略语适用 于本标 准。 3.1 CPE 致细胞病变作用 。 3.2 TCID50 半数细胞感染量 。 3.3 FM D 口蹄疫 。 原理 特异性的血清中和抗体与病毒结合后，能使病毒失去对敏感细胞的感染能力，从而阻止病毒的繁 殖。这一反应不但表现为一种病毒只能被相应的免疫血清所中和，而且还表现在中和一定量的病毒，必 须有一定效价的免疫血清。本标准规定的中和试验是以定量病毒稀释血清为基础，当血清能阻止定量 病毒50%致细胞病变能力时，其血清的稀释度即为其效价。因而本中和试验是一种定量测定口蹄疫血 清抗体的方法。 5试剂和材料 5.1本标准所用水应符合GB/T6682-1992中关于三级水(三蒸水)的规格。 5.2 本标准所用试剂配方参见附录Ae 5.3 本标准试剂除特殊规定外，均指分析纯试剂。 5.4 本标准所用试剂、玻璃器皿除有特殊规定外，均需高压灭菌。 5.5 病毒选用经蚀斑法纯化并经血清学鉴定的0,A,C,SATi,SAT2,SAT。和Asia1型口蹄疫细胞毒 分别作为各型血清抗体检测的标准毒。 1 SN/T1181.2-2003 5.6 标准血清:标准阴性血清采用无口蹄疫病毒抗体的猪血清或牛血清，标准阳性血清采用口蹄疫病 毒感染发病21d的康复猪血清或牛血清。 5.7 细胞系:IB-Rs-2或BHK-21细胞系。 5.8 细胞培养基:含10%无口蹄疫病毒抗体的胎牛血清(经56C,30min灭能)及抗生素的细胞培 养液。 5.9细胞维持液:含2%无口蹄疫病毒抗体的胎牛血清(经560C,30min灭能)及抗生素的细胞培