《SNT1181.1-2003-口蹄疫病毒感染抗体检测方法琼脂免疫扩散试验》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1181.1-2003 口蹄疫病毒感染抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 Detectionantibodiesagainstfootandmouthdiseasevirus infection-associatedantigen-Protocolagargelimmuno-diffusiontest 2003-03-17发布 2003-09-01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 sx/T 1181.1-2003 前 言 本标准根据OIE/Chapter2.1.1,4thedition,2000,诊《断试验和疫苗标准手册》(Manualofstand- ardsfordiagnosticTestsandVaccines)起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:徐海聂、薛景山、潘文波、廖秀云。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T1181.1-2003 口蹄疫病毒感染抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 范 围 本标准规定了口蹄疫病毒感染相关抗原琼脂免疫扩散试验操作规程. 本标准适用于易感动物血清中口蹄疫病毒感染相关抗原(VIA)之抗体检测，适用于各型口蹄疫的 检疫(无型别特异性)、疫情监测和流行病学调查。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682-1992 分析实验 室用水规格及试验 方法 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 3.1 AGIDagarimmun-odiffusiontest 琼脂免疫扩散试验 。 3.2 FMD footandmouthdisease 口蹄疫 。 3.3 VIAvirusinfection-assoxiatedagainst 病毒感染相关抗原。 3.4 Tris-HCl 三经甲基氨基甲烷一盐酸溶液。 原理 抗原及其特异性抗体在凝胶中从高浓度区域向低浓度区域扩散时所受阻力很小，基本上呈自由扩 散形式。由于不同抗原分子的分子量、结构、形状和电荷量不同，因此其扩散系数不同。当抗原和相应 抗体经扩散后在凝胶中相遇，形成抗原抗体复合物，若两者在相遇处比例适当，则形成最大的复合物。 由于复合物的分子量增大，颗粒增大，因而不再继续扩散而形成沉淀，呈现出线状或带状，其形成的线状 或带状的“特异性屏障”称为免疫沉淀线或免疫沉淀带。琼脂免疫扩散试验即根据标准抗原与被检血清 之间是否出现沉淀线来判定被检血清中是否存在特异性抗体。 SN/T1181.1-2003 5 试剂和材料 5.1 本标准所用水应符合GB6682-1992中关于三级水(三蒸水)的规格。 5.2 VIA抗原:为A型或O型口蹄疫病毒感染细胞的提取物，由指定单位提供. 5.3 标准阳性血清:为A型或O型口蹄疫病毒免疫牛或猪制备的抗血清，由指定单位提供。 5.4 被检血清:按常规方法采血并分离血清,56℃水浴灭能30min后使用，也可置4℃冰箱中