《SNT1181.3-2003-食道咽部口蹄疫病毒探查试验》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1181.3-2003 食道咽部口蹄疫病毒探查试验 Protocolofprobangtestforfootandmouthdiseasevirus 2003-03-17发布 2003-09-01实施 中 华 人 民 共 和 匡 国家 质 量 监 督检 验 检 疫 总 局 SN/T1181.3-2003 nil 言 本标准根据OIE/Chapter2.I.1,4thedition,2000,《诊断试验和疫苗标准手册》(Manualofstand- ardsfordiagnostictestsandvaccines)起草。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国珠海出人境检验检疫局、兰州生物药品厂。 本标准主要起草人:薛景山、吕宏、王小玉、陈兴芳、黄云君。 本标 准系首 次发布 的检验检疫行业标准 。 SNIT1181.3- 2003 食道咽部 口蹄疫病毒探查试验 范围 本标准规定了反当动物食道咽部的口蹄疫病毒查毒方法。 本标准适用于反当动物食道咽部口蹄疫病毒的分离。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682-1992 分析实验室用水规格及试验方法 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 FM D footandmouthdisease 口蹄疫 。 3.2 FM DV footandmouthdiseasevirus 口蹄疫病毒。 OP oesophagealpharyngealfluid 食道咽部乳液 PBS phosphatebufferedsaline 磷酸盐缓冲液。 3 5 CPE cytopathiceffect 致细胞病变。 6 3 . W E 1，1,2-trichorotrifluor-oethane 三氯三氟乙烷。 3.7 L-H 水解乳蛋 白溶液 原理 反当动物在感染FMDV后，其食道咽部具有长期带毒的特点。带毒时间因动物而异，往往数月或 I SN/T 1181.3-2003 数年不等。这一过程被称为 “持续感染，，。这一机理尚不明确的带毒现象给动物检疫带来了新的挑战。 这一特定带毒部位的发现使得从临床健康的感染动物中分离出感染病毒成为可能。普鲁斑试验就是通 过对反当动物食道咽部这一特定带毒部位刮取分泌物，继而进行病毒分离鉴定的试验。试验采用特定 的探杯刮取样品，用TTE处理样品以尽可能地降低可能存在的抗体对病毒分离的影响。将处理过的 样品接种到对FMDV易感的初代细胞上培养以达到分离和扩增病毒的目的。将培养产物通过血清学 试验或分子生物学试验方法进行鉴定从而达到确诊的目的。 5 材料准备 5.1 本标准所用水应符合GB/T6682-1992中三级水(三蒸水)的规格要求。 5.2 设备器材:食道探杯、5mL耐冷冻密封瓶,20mL广口瓶、普通恒温培养箱或二氧化碳培养箱、 25mL细胞培养瓶或24孔细胞