番茄nr基因的转化和表达及相关的胁迫乙烯反应食品科学专业论文.docxVIP

番茄限基因的转化和表达及相关的胁迫乙烯反应中文摘要 番茄限基因的转化和表达及相关的胁迫乙烯反应 中文摘要 逆境诱导乙烯的产生，乙烯又是高等植物胁迫反应的调节者。NR基因是乙烯受体蛋 白基因，与植物的抗性也有密切的关系。本研究建立了番茄高效遗传转化体系；获得了 用于乙烯逆境信号转导研究的NR突变体和抗性强的转基因番茄育种材料。通过各胁迫 因子与乙烯关系的研究和一系列生理指标的测定，通过NR基因mRNA含量的变化和 NR突变体在逆境下的表现，探讨了逆境在乙烯信号转导途径中的作用。庄要结果如下： l、丽春番茄分别在激素浓度为6一BA 2mg几+I从0．2mg几，6一队lmg／L+I从0．1mg／lJ 和6一BA 0．5mg几+I从0．1mg／L的培养基上生芽、长茎和生根，能获得高的转化率。 2、始终采用50mg几卡那霉素的选择压，直接用农杆菌原液侵染外植体，和马铃薯 浸提液、lmg／LI从处理农杆菌菌液，可使平均转化率达9—11％。 3、NR突变体节间长、分枝少，抗性强，果实成熟期延长。 4、乙烯使番茄幼苗叶片黄化、衰老和脱落、使番茄幼苗表现乙烯三重反应，这是 因为乙烯诱导了NR基因的表达，从而使番茄叶片细胞膜透性增大，蒸腾作用、呼吸作 用增强和增大气孔导度；但对番茄NR突变体植株影响相对较小． 5、Li+诱导乙烯和NR基因的表达；并与乙烯协同作用．促使幼苗表现三重反应， 增加细胞膜透性和短期内使植株蒸腾作用、气孔导度、呼吸作用增加：最后导致植株严 重受害。因此，Li+参与了乙烯的代谢，促进产生乙烯综合症． 6、低浓度的水杨酸使番茄黄化苗下胚轴伸长，呼吸作用降低；但有乙烯时、水杨酸 抑制幼苗的生长，并在短期内使其各项生理指标和NR基因的mRN^含量增高，植株叶 片黄化。NR突变体对水杨酸不敏感，水杨酸处理时、植株无外部受害症状，NR基因表 达少。因此，抑制NR基因的表达，可减少水杨酸对植株的危害，增强植株的抗性。 7、高浓度的IAA处理，使番茄黄化苗下胚轴迅速伸长，各项生理指标都保持较低 水平，表现出与乙烯相反的代谢。但IAA和乙烯的处理、使NR基因大量表达，番茄各 生理指标迅速增高，表现出乙烯综合症。 8、ABA处理植株后，在短期内、植株细胞膜透性变化不大，呼吸作用降低．随后． ABA导致气孔关闭，NR基因大量表达、叶片蒸腾、呼吸作用降低，细胞间二氧化碳浓度 增大。最终使植株生长受阻，番茄实生苗黄化。ABA与乙烯的作用加重乙烯综合症。 9、干旱诱导了NR基因的大量表达和产生乙烯综合症及干旱胁迫症状． 10、低温抑制NR基因的表达，延迟了受害症状的出现．植株叶片出现低温受害症状 时伴随着叶片膜透性、蒸腾作用、呼吸作用、气孔导度的增加。乙烯+低温处理使细胞 膜透性等上述指标增大得更多。 总之了趋境诱导乙烯的形成，乙烯又诱导NR的受体蛋白基因表达t最终导致信号 的转导和症状的出现。在胁迫中，NR基因表达量低，植株抗逆性强；NR基因表达量高， 植株表现乙烯综合症和其它受害症状；但NR基因的过量表达有利于植物降低对乙烯的 敏感性，起负调节作用。 关键词：乙烯 胁迫 NR基因信号转导 一 一 ±里壅些查兰竖主兰竺堡壅 Abstract when plant is subject to a Vari时of stresses，th。y o疗en exhjbit symploms of exposure to ethylene．This compIex reIationshjp betw它en stress and脚lene—like symptoms is herc cc玎ncd the s灯雠s ethylene syndrome．NR gene e，ds信豁卸et量lylenc rec印torwhich is di行bremiaIly reguIated，m锄y by variOIls gn℃s∞s and afrects ttIe托sist如ce Of pIant．A矗er transfomation system conducted by Ag∞b缸erium w∞modified for tIle tomato variety LicllII，seVeral mutallts OfNR gcne wefe gotten for research ofemylene signaI廿瓠sduction in stress conditiOn by t隋fIsfer ofantisense l心4A． The mle ofs订esses in e小ylene action has b∞n gtudi酣in tomalo(工“∞pP船耙铆∞c“缸n姗 c1，，缸矗“)t11】rough锄al蜘ng the们ple煅po璐c of to