半滑舌鳎生殖生理特性及gnrh克隆初步研究水生生物专业论文.docxVIP

半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究学位论文完成日期： 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究 学位论文完成日期： 竺!!：兰 指导教师签字： 答辩委员会成员签字： 半滑舌锦生殖生理特性及 GnRH 克隆初步研究 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究独创 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究 独创 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得—— !洼!塑递查基丝重要挂型主明的!奎拦卫窒≥或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：磊以 签字日期：列，，年厂月?口日 ，；-—_~ 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下 事项： 1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阅。 2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中 国学术期刊(光盘版)Eg子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》， 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 判位 敝文 作 者 劐孙 f7印 新粹却讯 l 字 刚期 吵y ∥年 §汨 勿 签字日期：。沙‘1年f月弓／日 半滑舌蹋生殖生理特性及 GnRH 克隆初步研究 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆初步研究 摘 要 本文以半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象，运用组织染色法、免 疫组织化学技术和放射免疫测定法(砌A)，对半滑舌鳎的性腺发育的生理特征、 血浆中性类固醇激素、性腺分化的内分泌调节及雄鱼对外源激素诱导的应答等进 行了研究，并运用RACE方法克隆出半滑舌鳎脑型cGnRH—lI基因cDNA全长。相 关结果与结论如下： 1．半滑舌鳎卵巢发育的生理学特征研究 采用组织学和形态测量法首次系统研究了人工养殖条件下半滑舌鳎亲鱼卵 巢的组织发育的周年变化特征。结果表明：卵母细胞发育可分为6个时相，卵巢 发育分为6期。卵巢不同发育时期都由不同类型的卵母细胞组成，半滑舌鳎为非 同步分批多次产卵类型。周年发育过程中，6月龄前的鱼卵巢发育处于第1期；9．12 月龄卵巢可发育至第1I期；12月龄半滑舌鳎性腺可发育达tlJlII期，并一直保持至 24月龄。3龄雌鱼达到性成熟，卵巢可发育至第Ⅳ期；随着水温和光周期的调控， 卵巢发育进入成熟期(V期)，发生水合现象是卵母细胞成熟并准备排卵的信号； 产卵结束后卵巢退化至第Ⅵ期，为排出的卵母细胞退化吸收，以III期卵巢越冬后， 卵巢退化至1I期并持续至下一个繁殖周期。人工养殖条件下，卵巢内存在卵母细 胞闭锁现象，可能是环境胁迫造成的性腺发育不良，同时也是分批产卵特性的一 种指示。 在半滑舌鳎性腺的年周期发育过程中，亲鱼各数量特征GSI、HIS、CF都表 现出规律性变化。性腺指数(G口)在性腺达到成熟期(V期)其达到峰值，GSI 在各月份间值差异显著(pO．05)。产卵结束后，GSI迅速下降并保持较低的水 平至下一个生殖周期。8月后，随着温光调控的进行，GSI显著上升(pO．05)， 于10．1 1月达到峰值。8．11月间GSI值与1．6月问值差异显著(pO．05)，据此 可将性腺发育分为8．11月的性腺发育成熟期和12月一7月的休整恢复期。亲鱼肝 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆的初步研究脏指数(删)，在产卵前7．8月份达到最大，统计分析表明，7月和8月HSI 半滑舌鳎生殖生理特性及GnRH克隆的初步研究 脏指数(删)，在产卵前7．8月份达到最大，统计分析表明，7月和8月HSI 与其4月．6月HSI值差异显著(p0．05)，表明7．8月份是性腺启动卵子发育、 卵黄能量储备的重要时期。肥满度(CF)值在4-6月与其它各月份差异显著(p O．05)，表明这段时间可能是亲鱼调整体内能量分配，进行生殖周期开始前相 关营养储备的重要时期，CF值在繁殖盛期10．11月份达到最大。 2．半滑舌鳎血浆性类固醇激素表达与卵巢发育及温光调控的关系研究 采用放射免疫法(RIA)、组织切片技术和形态测量法首次系统研究了人工养 殖条件下半滑舌鳎亲鱼卵巢的年周期发育过程中血浆中性类固醇激素【雌二醇 (E2)和睾酮(T