钝顶节旋藻高浓度nh4hco3耐受株诱变选育及二氧化碳浓缩机制相关基因表达分析遗传学专业论文.docxVIP

舢Y 舢Y ¨¨刖i■1一 舢9 舢2洲6 MZ舢4 Ⅲ0 钝项节旋藻高浓度NH4HC03耐受株诱变选育及二氧化碳浓 缩机制相关基因表达分析 徽 ㈣ 雠_ ㈣ ㈣ 凇撇觑 炭悬舣螓 锹激蝴 撬黼霾l 同签雠 黼荆群 删： 至 独创 独创 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得 !蕉!塑遣查基丝重要 特别声明的，本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同 工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：跃天群 签字日期：耖，／年f月多El 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下 事项： l、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阅。 2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中 国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》， 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：欲欠硅 导师签 签字日期：7,,／／年1月如日 签字日期：少、f年占月f日 钝项节旋藻高浓度NH4HC03耐受株诱变选育及二氧化碳浓缩机制相关基因表达分析 钝项节旋藻高浓度NH4HC03耐受株诱变选育及二氧化碳浓 缩机制相关基因表达分析 摘 要 节旋藻(Arthrospira)被世界粮农组织誉为21世纪人类最理想的食品，上 世纪80年代已经实现工业化养殖。进一步改良藻种种质，获得在工业生产上具 有优良性状的突变株，并深入了解与节旋藻光合作用密切相关的二氧化碳浓缩机 制对于节旋藻养殖有着重要的意义。 节旋藻正常生长需要氮源和碳源，而适宜浓度的NH4HC03可以同时为藻体 提供氮源和碳源。而且利用氨水吸收工业废气中的C02是新的发展趋势，有效 的利用NH4HC03对于节能减排有重要意义。高浓度的NH4+还可以在节旋藻大规 模养殖中对于原生动物有杀灭作用。但是高浓度的NH4+对于正常生长的藻体也 会有伤害，因此有必要筛选能够在高浓度NH4HC03下可以生长的钝顶节旋藻。 节旋藻的二氧化碳浓缩机制(CCM)在固碳过程中起着重要的作用。羧酶 体是CCM机制的主要元件，ccmM及ccmO编码了羧酶体包被蛋白相关基因； 且CCM机制的关键酶之一．碳酸酐酶现在还未有报道，而ccmM基因编码的蛋白 其N．末端结构域与Y．碳酸酐酶相似。因此本论文还试图通过实时荧光定量PCR (RT．PCR)手段了解ccmM及ccmO基因的表达特性，以了解钝顶节旋藻CCM 机制的表达情况。 本论文首先比较了紫外线、EMS、NTG三种不同诱变剂对于钝顶节旋藻的 诱变效果，选择了NTG作为最适宜的诱变剂诱导钝顶节旋藻发生突变。在 0．022mol／1NH4HC03的选择压下，筛选得到了8株能够耐受高浓度NH4HC03突 变株。并比较了诱变前后藻株在高浓度NI--hHC03条件下的生长速率及光合速率。 结果表明，0．004mol／l的NH4HC03最有利于出发藻株的生长，在NH4HC03 浓度为0．022mol／1时达到出发株的耐受极限。在8株突变株中有5株突变株对于 NH4HC03的耐受性与出发藻株有显著性差异。 比较0．022mol／l NH4HC03下各突变株的比生长速率，可以知道2号突变株 在0．004mol／!NH4+浓度时，比生长速率较出发藻株提高了29．3％，5、6、8号突 变株在400mg／l NH4+浓度时，比生长速率为正值，而同样处理条件下出发株的比 生长速率为负值。说明在此浓度的选择压下，突变株可以存活而出发株不能存活。 生长速率为负值。说明在此浓度的选择压下，突变株可以存活而出发株不能存活。 比较0．022mol／l NI-14HC03下各突变株的光合速率，发现2号突变株的最大 净光合速率在0．004mol／1 N144+浓度时出现，为3．066x104nmol·h～·cell～，比出发 藻株提高了14．8％，在160mg／lNH4+浓度时2号突变株的净光合速率比出发藻株 提高了93．7％。4、5、6、8号突变株的最大净光合速率都在0．008mol／l NH4+浓度 时出现，分别为2．883x104nmol·h．1·cell一、3．027x 104nmol·h。1·cell～、 2．969x104nm01．h．1·cell～、3．310