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通过色谱柱切换实现预处理的自动化-HitachiHighTechnologies.PDF
Hitachi High Performance Liquid Chromatograph
■通过色谱柱切换实现预处理的自动化
对生物样品或含有大量杂质成分的样品进行分析时,有必要实施蛋白质或杂质成分的去除及浓缩等预处理。预处理操作
对分析结果造成重大影响对分析结果造成重大影响,是非常重要的因素是非常重要的因素。而且操作过程中的很多细节依靠分析人员的操作经验和熟练程度而且操作过程中的很多细节依靠分析人员的操作经验和熟练程度,因此因此
进行“稳定的预处理操作”是极为重要的一步。
预处理方法,使用较为广泛的是固相萃取法或色谱柱切换法。
Chromaster系统采用了选择阀,由此可以通过色谱柱切换方式实现自动化预处理。
以血清中药物的分析研究为例进行介绍。
◆色谱柱切换方式来分析血中的苯妥英◆
样品制备:人体血清中添加苯妥英后,离心后取上清液,即可。
目的:研讨苯妥英分析的自动化预处理
苯妥英
*苯妥英为抗癫痫药,其有效血药浓度为10~20 µg/mL,血药浓度超过20 µg/mL 以上被认为是中毒范围。
【仪器配置】 [色谱条件]
流动相 (A) 50 mM KH PO -K HPO (pH6.9)/CH CN=95/5
2 4 2 4 3
(B) CH CN
Chromaster 5110泵 3
Chromaster 5210 自动进样器 *(A)/(B)= 65/35
Chromaster 5310柱温箱 流速 1.0 mL/min
(装配2位6通阀)
色谱柱 LaChrom C18 (5 µm) 4.6 ×150 mm
Chromaster 5420紫外-可见检测器
柱温 40℃
检测波长 210 nm
色谱柱
泵1 UV-VIS 废液
检测器
(A ) (B)
自动
废液 进样器 泵2
[预处理条件]
预处理柱
流动相 (A) 50 mM KH PO -K HPO (pH6.9)/CH CN=95/5
2 4 2 4 3
(B) CH3CN
Chro
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