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浅谈婴儿配方乳制品中维生素A酯类分布情况和稳定性 摘要：目的对婴儿配方乳制品中维生素A酯类的分 布情况以及稳定性进行分析探讨。方法建立高效液相色谱 法，结论采取高效液相色谱法对婴儿配方乳制品中维生素A 脂类分布和稳定性考察结果准确可靠，值得关注并推广。 关键词：高效液相色谱法婴儿配方乳制品维生素A醋 酸酯维生素A棕桐酸酯 研究证实，维生素A属于一种脂溶性维生素，可以维持 视觉和骨骼健康，并参与了细胞分裂、细胞识别、生长发育、 维持免疫系统完整性等诸多生理功能。目前婴儿配方乳制品 中对微生素A含量做出了明确规定，允许添加维生素A醋酸 酯、维生素A棕桐酸酯等酯类成分［1］。本次研究中出于对 婴儿配方乳制品中维生素A酯类的分布情况以及稳定性进行 分析探讨的目的，建立了高效液相色谱法，现汇报实验结果 如下。 材料与方法 1. 1仪器与试剂 本次实验中所需仪器为我实验室现有高效液相色谱仪 以及相配套的紫外检测器等，除此外还需用到氮气吹干仪、 低速台式离心机等。 所需试剂包括：甲醇、乙醇、三氯甲烷为色谱纯，氯化 钠为分析纯，维生素A醋酸酯、维生素A棕扌闾酸酯标准品。 实验中样品为市售不同厂家同一配方的婴儿奶粉。 1. 2方法 1.2. 1标准溶液的制备 精密称取10mg的维生素A醋酸酯和维生素A棕桐酸酯, 经甲醇定容至100ml容量瓶内，制成浓度为100ug/ml的标 准储备液液。取lml维生素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯标 准储备液，在50ml容量中经家传溶解后定容，制成质量浓 度为2ug/ml的标准溶液。 1.2.2样品处理 取0. 25g样品精密称定后放置在10ml离心管中，10ml 温水溶解，加入体积为2.5： 1的三氯甲烷和甲醇混合溶剂 7ml,充分溶解后漩涡震荡5分钟，静置5分钟后加入lml 饱和氯化钠，反复震荡，在2500r/min条件下离心处理5分 钟，在氮气下降三氯甲烷吹干，经甲醇溶解后过0.22um微 孔滤膜，棕色瓶收集。 1.2.3色谱条件 色谱柱为TC-C18柱，柱温为30°C,流动相为甲醇-三氯 甲烷二80： 20,等度洗脱，流速为1. Oml/min,检测波长为 325nm,进样量为20ulo 结果 2. 1线性关系考察 实验中分别配制了一系列浓度（1. 00、2. 00、3. 00、4. 00、 5. 00ug/ml）的维生素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯标准溶 液，在1.2.3条件下进样检测，以峰面积作为纵坐标，以标 准品浓度作为横坐标，的标准曲线Y=303239X-7112. 1, r=0. 9998,维生素A醋酸酯和维生素A棕桐酸酯浓度在 l-5ug/ml范围内存在良好线性关系。 2.2重现性考察 取同一样品溶液在1.2.3条件下进样检测，连续检测6 次，观察峰面积，计算RSD值，结果发现维生素A醋酸酯和 维生素A棕桐酸酯峰面积RSD值分别为1. 2%和1. 5%,在允 许范围内，证实重现性良好。 2. 3加样回收实验 表1维生素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯加样回收实验 结果 2.4稳定性考察 取相同浓度的维生素A醋酸酯和维生素A棕桐酸酯，经 乙醇溶解后分别在日光、30W日光灯以及黑暗处在不同温度 的水浴锅中进行保存，对光和温度对维生素A酯类稳定性进 行考察。定时取样在1.2.3条件下进样检测，计算残留率。 结果发现，在25￡条件下，两种维生素A酯类成分均较稳定, 5小时后的吸光度残留率分别为99. 21%和99. 76%,随着稳定 的升高，稳定性逐渐降低，且在相同的温度下维生素A棕桐 酸酯的稳定性高于维生素A醋酸酯。维生素A酯类在日光条 件下不稳定，1小时后残留率几乎为0,在日光灯下具有较 高的稳定性,5小时后吸光度残留率分别为95. 32%和93.41%, 在黑暗条件下稳定效果理想，5小时后残留率分别为99. 13% 和 99. 89%o 2. 5样品中维生素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯含量测 定 取1.2.2配制的样品溶液20ul,在1.2.3条件下进样检 测，重复操作3次，取平均值，计算维生素A醋酸酯和维生 素A棕才闾酸酯含量。结果详见表2。 表2样品中维生素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯含量测 定(IU/100g) 讨论 婴儿配方奶粉为母乳的最佳替代品，对婴儿配方奶粉进 行评价的一个重要指标为母乳化程度，要求配方奶粉中各种 营养成分含量应与母乳接近［2］。近几年的研究发现［3］,在 婴儿配方奶粉评价中维生素A宏观分布已经成为一项重要指 标。本次实验中建立了高效液相色谱法对不同常见婴儿配方 奶粉中维生素A酯类成分分布和稳定性进行了检测，一系列 方法学考察结果发现，本次建立的高效液相色谱法在对维生 素A醋酸酯、维生素A棕桐酸酯进行检测时的线性关系良好, 回收率高，重现性理想，精密度良好，在婴儿配方奶粉中维