基于邻苯二甲酸酯的四种人工抗原的制备及免疫鉴定化学工程专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 分类号： 分类号： 学校代号：11845 UDC： 密级： 学 号：2111206073 广东工业大学硕士学位论文 (工程硕士) 基于邻苯二甲酸酯的四种人工抗原的制备及免 疫鉴定 赖丹 指导教师姓名、职称： 赵壶渲塾握 企业导师姓名、职称： 五 专业或领域名称： 丝堂工猩 学生所属学院： 墅王丝王堂瞳 论文答辩日期： 星Q!墨生鱼旦墨目 万方数据 A A Dissertation Submitted to Guangdong University of Technology for the Degree of Master of Engineering Science The preparation of four phthalate plasticizer artificial antigens and their identification by immunoassay Master Candidate：Lai Dan Supervisor：Prof．Zhao Suqing June 2015 Faculty of Chemical Engineering and Light Industry Guangdong University of Technology Guangzhou，Guangdong，P．R．China，51 0006 万方数据 摘要摘要 摘要 摘要 塑化剂是工业上广泛应用的增塑剂，有增强物质柔韧性的作用。主要用于聚氯乙 烯塑料、食品包装袋、儿童玩具、香料、化妆品等的生产。同时塑化剂也是环境激素 类污染物，它可以在一定条件下从塑料中通过溶出、迁移和排放等途径进入周围生态 环境，甚至通过皮肤、呼吸系统和消化系统进入人体，进而对人体健康造成潜在危害。 因此，建立一种快速检测塑化剂的方法具有十分重要的意义。 本文以4一硝基邻苯二甲酸为原料，分别与不同的醇反应衍生合成四种塑化剂结构 类似物，包括直链结构的4一氨基邻苯二甲酸二丁酯、支链结构的4．氨基邻苯二甲酸二 异丁酯、具有连接臂的4一戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯和具有环状结构的4一氨基邻苯 二甲酸二环己酯。通过重氮化法和活泼酯法将各种半抗原衍生物与载体蛋白牛血清白 蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制得人工抗原。利用氢核磁共振谱图(1H NMR)、 质谱(MS)和红外谱图(IR)鉴定了主要的衍生物结构。利用紫外光谱扫描和SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)检测鉴定人工抗原，并用四种与BSA偶联的人工 抗原作免疫原免疫新西兰大白兔，以制备多克隆抗体。利用酶联免疫分析法(ELISA) 检测抗体灵敏度和特异性。 经紫外光谱和SDS—PAGE电泳证实人工抗原偶联成功，经免疫分析法检测抗体效 价，DBAP—BSA抗体达到1：64000，DBCP—BSA、DiBAP—BSA和DCHAP—BSA抗体效 价均达到1：128000。检出限分别是：DBAP—BSA(52．8n∥mL)、DBCP—BSA05，5n∥mL)、 DiBAP-BSA(8．7n∥mL)、DCHAP-BSA(11．9nWmL)。最佳工作范围分别为：DBAP—BSA (81．96-1 138．037n∥mL)、DBCP—BSA(55．72-832．945nNmL)、DiBAP—BSA (16．753～857．328nNmL)、DCHAP—BSA(63．997～1222．221n∥mL)。样品加标回收率 均在86％～105％范围内。由此可以得出以下结论： 1)成功合成四种塑化剂半抗原衍生物。 2)四种塑化剂抗体反应特异性较好。 3)具有支链结构的DiBAP—BSA抗原在体内更容易被识别产生相应的抗体，其次为环 状结构的DCHAP—BSA抗原和具有伸长臂结构的DBCP．BSA抗原。 关键词：邻苯二甲酸酯；人工抗原；免疫分析；抗体：检测 万方数据 AbstractPhthalates Abstract Phthalates are plasticizers which were widely used in industry process and other consumer products to make them flexible．These products are that we use every day such polyvinyl chloride plastics，food packing bags，children’S toys，spices，cosmetics and SO on． At the same time，phthalates are environmental hormones contamination．They b