细胞与分子生物学实验教程期末复习总结.docVIP

by本雇 先喝口热翔 我之所以写这份资料，也许为了给其他正在为准备这门实验课考试的同学提供一点点的帮助, 更深层的意义也许是为了跟同学们交流学习方法，当然练习打字速度这个目的我也承认。诚 然，我不是学霸，但隔丝也有一颗高帅富的心，备胎也nJ以玩出个优雅，于是天亮了！这里， 必须向大家做一下说明并表达一下歉意，因为这份资料有很多空出的地方，而这些地方是没 有答案的！要自己从书屮找！而重点就是空岀的那些部分。到这儿，我听到同学们异口同声 地说，坑爹啊！这个，这个嘛，童鞋请淡定，其实呢任何事物都是有利有弊的，这些坑儿既 然被我挖出来必定都是可以填回去的，大家只要稍稍翻一下廿，就能找到正确答案了。而R 仅仅总结的这些必然是不够的，我也希望大家在找答案的同吋能顺便多翻翻卩和课件，留有 更多印彖。真的碰到找不到的答案也没冇关系，必须是我设计时候存在的缺陷，这里就提前 给跪舔了，求别说。最后一点，它的试用范围是临床医学五年制细胞与分子生物学实验课期 末考询的复习，临床八年或其他专业的同学也可以参考。考前给大家一点小捉示：记住考试 时带上白大褂哦亲。先实验，后笔试的。最后老毅丝都喜欢用一句意味深氏的话结尾：当考 完试的你信步从容边出考场，才懂得什么叫做没扔实验垃圾扌II一分。 教材來源：【人民卫牛出版社】作者：卢健 所学内容： 第二章 实验一血清蛋口醋酸纤维薄膜电泳① 实验五凝胶柱层析分离鉴定蛋白质② 实验六DNS-氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析③ 实验十三标准曲线法测定蛋口质含量④ 实验I ?五聚合酶链反应（PCR）与琼脂糖凝胶电泳⑤ 实验二十二显微镜使用⑥ 实验二T?五蟾赊血细胞的体外融合⑦ 实验二十六细胞有丝分裂及细胞骨架的显微观察⑧ 实验二T ?七动物染色体的制备⑨ 笫三章 实验一标准管法测定葡萄糖含量⑩ 第四章 实验一高分子量DNA小鼠肝细胞DNA提取国 实验二AKPKm测定也 ① 血清蛋白的等电点都在 以下，所以在PH8.6的巴比妥缓冲液以 形式存在。 点样时点在酷酸纤维薄膜 光泽血，电泳时 光泽面向下，所用染料为 *（注：此符号代表不需耍掌握只需要了解的内容，下同） *每条区带是否只代表一种蛋白质？ 否，因为条带的位置与蛋口质所带电荷Q,半径r有关，具有相近特性的蛋口质位直不易区 分 ★电场越高越好？ 否，电场强度过高，导致蛋白质在膜上电泳过程中温度升高，可能导致蛋白质在电泳过程中 温度升高，可能导致蛋白质的变性从而影响实验结果 *条带带宽、颜色深浅、顺序与蛋口质的量、等电点、分子量的关系？ 电泳后条带带宽、颜色深浅与蛋白质的量冇关，蛋白质的含量越人，条带越宽，颜色越深, 而条带的顺序则与等电点与分子最有关，等电点越低，分子最越小，离点样线距离越远 ② 以Folin-Denis反应检查流出液中蛋白质，主要靠蛋白质中的 与 先出来的是相对分子质量 的 比较腺酚活性所用试剂为 试剂 *向凝胶柱加入样品时，为什么必须保持胶血平整？上样体积为什么不能太大？ 因为如果胶而有斜而会导致起点位置的差异，从而层析出的结果受影响。而上样体积太人, 样品内两种蛋口质分布不均匀也会影响层析结果 ③ 双向聚酰胺薄膜层析的原理 聚酰胺上的酰胺基团与氨棊酸形成 ,各种氨基酸形成 能力的强弱不同, 决定了 的差异， 则展层速度 则展层速度—，各物 质因此在聚酰胺薄膜上分离。 展层溶剂与被分离物质在 表面竞争 ,被分离物质在 与聚酰胺薄膜表 面 产生差异，—于展层溶剂的 ,不溶于 的 *本方法能否用于分离核苜及核昔酸，为什么？ 能，因为核齐与聚酰胺薄膜形成氢键能力较弱，但核芹酸可以，因为核背酸多了磷酸基团， 形成氢键的能力增强了。 * （背光为黄色的为重点，下同） 比移值Rf二原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 DNS?氨基酸在紫外线照射下发黄色荧光 本实验中固定相是 ，流动相是 （极性） 和 （非极性） *DNA定量测定的方法有哪六种？ 双缩脈法优点为干扰物质 ,较—速，缺点是灵敏度—，范I剤是 Ug 分光光度计在波长 nm处，测出各管吸光度 含有两个以上 的物质在 溶液中与 反应生成紫红色络合物，即为双缩腺反 应 干扰实验的因索有 、 和 干扰实验的因索冇硫酸钱、Tris缓冲液、和某些氨基酸 *双缩脉法测定蛋白质含量的原理是什么？ 蛋白质在碱性溶液里与Cu2+反应生成紫色络合物，一定范|韦|内，紫色络合物颜色的深浅与 蛋口质含量呈正比，而与蛋口质的相对分子质量及氨基酸成分无关，故可用來测定蛋口质的 含量 DNA模板变性在_变性，形成 退火，降温至 ,加入反应休系两种 退火至相应互补的DNA链上 引物延伸，调节到DNA聚合酶最适温度 ,在4种 存在下，由 延伸，而 新合成的引物延仲链则可作为下一轮反应的模板 原料包括样品，寡核廿酸引物，4种