红掌组培方案一.docVIP

红掌组培研究方案 食品与生物技术系何海慧1102040220 指导教师：黄峰 红掌（Anthurium andraeanum）属天南星科，花烛属多年生常绿 草本植物，别名花烛、红苞芋、幸运花等，原产中美洲，喜温暖、湿 润、阴暗环境，特别适合室内观赏，兼作鲜切花，为当前国际流行的 名贵花卉。在全球热带花卉贸易中，红掌销量居第二位，欧洲、美国、 日本是红掌主要消费市场，栽培口动化程度很高，栽培面积不断扩大, 我国红掌商业化生产，尤其是工厂化组培快繁，还处于起步阶段。大 理州经济作物科学研究所采用组培快繁技术对红掌进行快繁研究已 取得初步成效，为进一步推动我国发展新兴的红掌产业及消费市场奠 定理论依据。 1、无菌系建立技术研究 1?1试验材料：红掌茎尖，已灭菌（温度121°C,压力1. lkg/cm2,时 间20min）的基本培养基，培养基成分为MS+糖30g/L +琼脂6. 8g/L, PII 值为 5.8. 1?2、试验方法：采用酒精、漂白粉、升汞的不同组合及不同灭菌时 间，对取口红掌母株上的茎尖进行灭菌处理，先用洗衣粉浸泡lOmin, 再在自来水下冲洗1小时，再在超净台上采用不同灭菌方法处理（见 表1）,接种在已灭菌的培养基上，在培养间培养7天，观察并记录 污染结果，计算污染率，研究出最佳灭菌方法。 3无菌系建立试验结果 表1:各灭菌处理组合及结果 处理 污染率 A处理:酒精30S+0. 1%升汞12min B处理:酒精30S+5%漂白粉13min+0. 1%升汞 8min C处理：酒精30S+5%漂口粉13min 从试验结果：(待填) 2、增殖培养基筛选技术研究 2.1供试材料：在愈伤组织诱导培养基上经长吋间诱导，分化形成 0. 3-0. 5cm高的带愈伤组织小苗，再在分化培养基上进…步增殖，分 化出1. 5-3. 5cm高的小苗。 2试验经过：试验设计采用二因素多水平，随机区组，3次重复。 6-BA (a 因素):Ai (Omg/L) A2( 1. 5mg/L) A3(3. Omg/L) A4 (4. 5mg/L) o NAA (b 因素):Bj (Omg/L)、B2 (0?5mg/L)、B3(l. Omg/L) o 培养基 苴它成分用量：蔗糖30g、琼脂6.8g, PH=5.8,每一处理制1升。在 一致的环境(温度25±2°C,光强1000-2000LX,每日光照9-10小时) 下培养，每瓶接4份材料，每份材料剪切3苗高1.5-3. 5cm的单株， 苗基本部均带约0.5X0. 5X0. 5cn?的愈伤组织块。每一处理随机取样 3瓶，调查组培苗平均增殖苗数，计算平均增殖率，进行方差分析和 LSR检测。 表2、增殖率统计表(％) 处理 增殖率(%) 增殖率位次 LSR检测 I II III 合计 平均 AiBt be A1B2 be A1B3 be A2B1 be A2B2 be A2B3 be A3B1 be A3B2 be A3B3 be Ab be AA a A4B3 c E T 二 注：a：每块材料1单芽或带有1大于加m的小芽统计为2,不 足2mm的芽点突起不计。b：增殖率计算式为:继代56天后平均芽数 /继代当天平均芽数X100%o 3、生根培养基筛选研究 培养基设置六个处理配方见表3,均为固体培养基，均采用 蔗糖30g/L为碳源，琼脂用量6. 8g/L, pH值为5.8,配制培养基用 去离子水。 表3 6种不同成分的培养基配方 处理号 培养基成分 1/2MS+NAA0. 05mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L m2 1/2MS+NAA0. lmg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L m3 1/2MS+NAA0. 5mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L m4 1/2MS+NAA1. 0mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L m5 1/2MS+NAA1. 5mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L Mb 1/2MS+NAA2. 0mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 6. 8g/L 3. 2试验操作方法和培养条件 在无菌条件下，取生长基木一致的组培瓶苗作为试验基础苗，转 接于盛有35ml经过高压灭菌（温度121°C,压力1. lkg/cm2，时间 20min）的上述6种培养基的瓶中进行培养，每瓶接种10苗，每个处 理20瓶，重复3次。均在温度25±2°C,光强1000-2000LX,光照 9-10h/d的条件下培养。 3结果与分析：（待填） 表4不同培养基对红掌组培苗生根指数的影响 试验号 调查株数 （株） 长根 平均单株 总根长（cm） 根指数 株数（株） 1工习甲休 根数（条） 根数X根长  m2 M3 m4 m5 M6 结果表明：(待填) 4、炼苗基质筛选