不同浓度医用臭氧对大鼠星形胶质细胞影响的体外观察麻醉学疼痛诊疗专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文符号说明 山东大学硕士学位论文 符号说明 Ast astrocytes 星形胶质细胞 02 oxygen 氧气 02-03 oxygen-ozone 医用臭氧 DMEM Dulbecco’S modified Eagle’S medium Dulbecco改良MEM培养基 PUFAs polyunsaturated fatty acid 多不饱和脂肪酸 LDH lactate dehydrogenase 乳酸脱氢酶 GFAP glial fibrillary acidic protein 胶质纤维酸性蛋白 ROS reactive oxygen species 活性氧族 LOPs lipid oxidation products 脂质过氧化物 NF．心 nuclear factor rd3 核因子1出 HSP heat shock proteins 热休克蛋白 KQ adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 2，3-DPG 2，3-diphospho—glycerate 2，3---磷酸甘油 NADPH nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 BCA bicinchoninic acid 二喹啉甲酸 XOD xanthine oxide 黄嘌呤氧化酶 TBA thibabitudc acid 硫代巴比妥酸 DPNH dinitro-phenyl—hydrazine 二硝基苯肼 Ⅳ【士SD means and standard deviation 中位数士标准差 LSD least significant difference 最小显著差 CM complete medium 完全培养基 H202 hydrogen peroxide 过氧化氢 ANO朔 analysis of variance 重复测量资料的方差分析 OD optical density 吸光度 r．p．m roll per minute 转／分钟 h hour 小时 mill minute 分钟 5 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： )虱b鱼一 日 期：3．衄占=茎=l至 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：!虽互主导师签名：4鲨查兰!日期：碰坌墨sj) 山东大学硕士学位论文不同浓度医用臭氧对大鼠星形胶质细胞影响的体外观察 山东大学硕士学位论文 不同浓度医用臭氧对大鼠星形胶质细胞影响的体外观察 硕士研究生 周乃宝 专 业 麻醉学 导 师 傅志俭 中文摘要 目的： 体外培养大鼠星形胶质细胞(Ast)并观察在不同浓度医用臭氧 (02．03)作用后细胞形态、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水 平及乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、死亡细胞百分比的变化，探讨较短时间内医用 臭氧对大鼠Ast功能及形态的影响，评价医用臭氧的神经毒性。 方法： 参照McCarthy和Dvellis的方法，通过胰酶消化、差速培养、传代 纯化等技术体外培养大鼠Ast并进行鼠抗胶原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞 化学鉴定；大鼠Ast传代接种入24孔培养板，分为7组(萨7)：空白对照组(C 组)，不加干预；纯氧组(02组)：加入400ttL纯氧作用20rain后的完全培养基； 医用臭氧02．0310组、02-0320组、02．0340组、02-0360组、02—0380组分别加入4009L 的10№o／mL、201ag／mL、401ag／mL、60t憎／mL、80Hg／mL医用臭氧作用20min后的 完全培养基，分别于2h、4h时点观察细胞形态、收集细胞悬液及破碎细胞后黄 嘌呤氧化酶法测定细胞SOD水平、硫代巴比妥酸法测定细胞MDA水平、简易 测定法测定细胞LDH漏出率、台盼兰染色计数死亡细胞百分比。 结果： (1)相差显微镜下形态观察Ast传3~4代后几呈单一的扁平多角形 细胞，并且培养细胞95％以上为GFAP染色阳性细胞。 相差显微镜下，与C组比