猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与药敏试验.pdf

江苏农业科学　２０１４年第４２卷第１０期 — ２０７— 王　涛，陈广仁，蔡丙严．猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与药敏试验［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（１０）：２０７－２０８． 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与药敏试验 １ ２ １ 王　涛 ，陈广仁 ，蔡丙严 （１．江苏农牧科技职业学院动物医学院，江苏泰州２２５３００；２．江苏省建湖县草堰口兽医站，江苏盐城２２４７３３） 　　摘要：从苏北地区某疑似猪传染性胸膜肺炎发病猪采集病料，经细菌分离培养得到３株分离株，分别命名为 ＹＣ０１、ＹＣ０２、ＹＣ０３。经形态学检查、ＣＡＭＰ试验、卫星生长现象、尿素酶试验鉴定，３株分离菌均为猪传染性胸膜肺炎 放线杆菌。药敏试验显示，３株分离菌对头孢噻肟、氟苯尼考及由板蓝根、麻黄、连翘等组成的中药复方高度敏感。采 用高敏药物对某感染猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的商品猪场进行治疗，结果表明，板蓝根、麻黄、连翘等组成的中药复 方水提物口服与头孢噻肟肌肉注射联用对控制猪传染性胸膜肺炎死亡有较好效果。 　　关键词：胸膜肺炎放线杆菌；分离鉴定；药敏试验 　　中图分类号：Ｓ８５２．６１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１４）１０－０２０７－０２ 　　猪传染性胸膜肺炎（ｐｏｒｃｉｎｅｃｏｎｔａｇｉｏｕｓｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｉａ， 于杭州天和微生物试剂有限公司；金黄色葡萄球菌由笔者所 ＰＣＰ）是由猪胸膜肺炎放线杆菌（ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕ 在实验室保存；待检病料来源于苏北某规模猪场疑似胸膜肺 ｍｏｎｉａｅ，ＡＰＰ）引起的猪的一种接触性呼吸道传染病，以急性 炎的发病猪；试验猪场为建湖县某商品猪场，存栏１１５３头。 出血性纤维素性肺炎、慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为主要 １．２　方法 ［１］ 特征 。２～５月龄猪最易感，急性暴发时，有很高的发病率、 １．２．１　细菌的分离培养与形态观察　无菌取死亡猪的气管 死亡率，一些病猪康复后常伴有慢性肺炎，导致猪生长停滞且 分泌物、肺脏作触片，革兰氏染色，镜检。同时取病料接种于 长期带菌，从而成为其他猪的传染源，此病给养猪业造成较大 含０．０４％ ＮＡＤ的ＴＳＡ琼脂平板，在需氧及５％ ～１０％ ＣＯ ２ ［２］ 的经济损失 。ＡＰＰ是革兰氏阴性、有荚膜的多形球杆菌， 条件下３７℃培养２４ｈ，挑取可疑菌落涂片，镜检。纯培养后， ［３］ 有时呈线性，无鞭毛，不运动，不形成芽孢。根据培养时是否 －７０℃下用５０％甘油生理盐水保存备用 。 需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉ １．２．２　ＣＡＭＰ试验　用金黄色葡萄球菌在兔血琼脂平板上 ｄｅ，ＮＡＤ，又称Ｖ因子），可将ＡＰＰ分为生物 型、生物 型， 划１条直线，再用分离菌划与该线垂直但不相接触的２条线， Ⅰ Ⅱ 生物 型为ＮＡＤ依赖株，包括血清型 １～１２型、１５型，生物 ３７℃ 培养２４～３６ｈ，观察试验结果。 Ⅰ Ⅱ型生长不依赖ＮＡＤ，但需要其他特定嘌呤或嘌呤前产物以 １．２．３　卫星现象　取分离菌均匀涂布于普通琼脂培养基上， ［１］ 辅助生长，含有２个血清型，分别为血清型 １３型、１４型 。 再在培养基中央作２条金黄色葡萄球菌平行划线，３７℃有氧 对ＡＰＰ的分离鉴定是确诊ＰＣＰ感染的重要依据，常用的方法 条件下培养２４ｈ，观察菌株生长情况。 是细菌分离、ＮＡＤ依赖性、ＣＡＭＰ、尿素酶等生