脂肪酶测定SOPLIP临床意义.docVIP

脂肪酶测定 版本号： 页码：第页共页 1检测原理 当辅助脂肪酶、胆汁盐和氯化钙存在，脂肪酶能催化脂肪酶底物1,2-0-双十二烷基-rac-甘油-3- 戊二酸-（6,-甲基试卤灵）酯的水解（反应图示如下）。通过水解生成不稳定的中间产物戊二酸-6 -甲基试卤灵酯。然后中间产物被H20水解生成游离的甲基试卤灵，在577 nm波长上吸光。用 577/700 nm的双波长反应可测定脂肪酶的活性。反应的比率与样本中脂肪酶的含量成正比。 1,2-0-双十二烷基-rac-甘油- 脂肪酶 1,2-o-双十二烷基-rac-甘油+ ? 3-戊二酸-（6,-甲基试卤灵）酯 戊二酸6, -甲基试卤灵酯（不稳定） 戊二酸6-甲基试卤灵酯 H.0 戊二酸+甲基试卤灵（在577 nm波长上吸光） ? 2标本采集与处理 1采血方法 空腹采不抗凝静脉血2~3ml。 2标本保存 血清屮的脂肪酶在室温下可保持一周的稳定性，在2 ~8 °C下可保持三周的稳定性。 3注意事项 样本的细菌污染可能导致脂肪酶值升高。乙二胺四乙酸、草酸钾、氟化钠和柠檬酸盐已证明对脂 肪酶的测试结果有抑制作用，故不应使用。标本应避免溶血、脂血、黄疸。 3试剂和设备 3.1试剂 采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船1~3孔为脂肪酶底物0. 24 mM,胆汁盐10 mM,钠盐，钾盐，酒石酸盐缓冲液1.6 mM,片 剂；4?6孔为三軽甲基氨基甲烷缓冲液50 mM,氯化钙2.0 mM,辅助脂肪酶2.8 x 105 U/Ld,片剂； 7~8孔为NaOH 0. 53 M,液体。 1.2试剂准备 直接使用。 1.3试剂保存 试剂2?8￡保存，有效期内稳定。 2质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 脂肪酶测定 版本号： 页码：第页共页 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500?3000「/min,离心6?lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8°C保存。 4标本检测 4. 1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter?在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需耍选择相应的 按键改变Mode （按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。 4. 4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4. 4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Rim键，仪器开始进行 样品检测。 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按口期放好，保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 直接使用，2?8 °C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5:PR0CESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-*F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator^校准液货号Calibrator 脂肪酶测定 版本号： 页码：第页共页 Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照市低到高的顺序输到对应位置，按F4： ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架上，按F7： LOAD/RUN-F4： RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10?-70°C可保存到瓶身有效期，未开启2-8°C可保 存90（1,开启后2?8°C可保存30d o 6.2质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。 6.3质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7性能参数 本法线性范围为50~1500U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀