盐胁迫对苜蓿叶绿体SOD同工酶的影响.PDF

维普资讯 2002丘 青海师范大学学报(自然科学版) 2002 第2期 Journalof 嘞 aiNomutluIIiversi押(Ⅳ目m Science) No2 文章编号：1001—7542(2002102—0054—02 盐胁迫对苜蓿叶绿体 SOD同工酶的影响 金 兰 (青海师范大学 生物系，青悔 西宁 8t0006) 摘 要：盐胁迫下苜穑叶绿体内SOD同工酶与对照组较大的差异 ．对照组中迁移率较快的SODCl 酶谱带一经盐处理后消 失 ．这二条酶谱带可能与植物的盐代谢密切相关。 关键词：盐胁迫；苜蓿；叶绿体 SOD同工酶 中田分类号：O舛5．14 文献标识码 ：^ Meeo~等(1969) 报道SOD的酶学特征以来，以SOD为中心的生物活性氧化代谢研究进展迅速， 鉴于它能催化超氧化物阴离子 自由基(02一)的歧化作用成为分子氧或过氧化氢 ，因而在控制脂质氧化， 减少膜系统的伤害方面具有一定的保护作用。Takahan等(198o) 报道了氧分能促进工菠菜叶绿体膜 过氧化作用，而SOD能有效控制这一作用，Kalir(1981) 以马齿苋为材料分析耐盐性，也证明了SOD同 样与植物组织的保护性反应有关。本试验用聚丙烯胺凝胶电泳的方法分析，研究了在盐胁迫下苜蓿叶 绿体 SOD酶谱带的变化，从而为耐盐育种提供参考。 l 材料与方法 1．1 材料：将来 自青海牧科院种子库的苜蓿种子种植于洁净的石英砂塑料花盆中，每天用 1：4的 H0-且nd培养液浇灌两次。植物光照强度控制在 30(X)40001x，温度 25％，日照时间 15h，待植物长至 5 片真叶时，用盐处理 。 1．2 方法 1．2．1 植物盐处理，选取生长一致的六盆苜蓿，一盆为对照，每天仍浇H0n出nd培养液，其余五盆分别 用 50nmtoUL№a，lOOrmnoLtLNaCI，lo0蛐mvLNaCI+lmmol／Lk +lmn~l／LC ’2ml，175mmol／LNaG． 175mmol／LNaCI+lmmoULk lml+1rmnol／Lca22ml处理。为了避免盐冲击，从 50mm]／L开始，每天递增 25mrnol／L．达到预定 的 175rmnol／L浓度。 1．2．2 酶液的提取：取生长旺盛的同质叶片，按陈一舞 的方法进行酶液的提取。 1．2．3 酶的聚丙烯酰胺凝胶 电泳 按陈一舞_5的方法进行，SOD酶液的进样量是3o以，电泳是在2—3 冰箱中进行，电流为50MA，稳 压为 100V，电泳时间为 4ho 1．2．4 染色：按陈一舞、常汝镇等 (1971)方法进行。 】．2．5 扫描：以胶片为扫描对象，在HPSearJ,et5P扫描仪上进行扫描。 2 结果 无盐及盐胁迫下苜蓿叶绿体 SOD同工酶酶谱图。 2．1 无盐胁迫下SO1)酶谱类型 有研究表明…，生物体中已发现的SOD有三种，即：Mn—SOD，ZnCu—SODFe—SOD，其分子量分别 收稿 日期：2001一II一 作者简介：金兰(1965一)．女．青海湟中^．讲师。 维普资讯 第2期 金兰：盐胁迫对苜蓿叶绿体SOD同工酶的影响 55 为400∞一80000，320(30，38000。前 2种存在于原核及真 核细胞中，Fe—SOD存在于原核细胞中。罗光华 ]，刘鸿 先 ，武宝王F 等对于不同植物在不同条件下的研究表 明，大豆花生种子，黄瓜幼苗子叶，小麦花生叶细胞等形 成的SOD酶谱带