链霉菌CPCC203702中抗结核分枝杆菌活性次级代谢产物的分离与鉴定.PDF

中国医药生物技术 2015 年 8 月第 10 卷第 4 期 Chin Med Biotechnol, August 2015, Vol. 10, No. 4 351 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.04.016 ·论著· 链霉菌 CPCC 203702 中抗结核分枝杆菌 活性次级代谢产物的分离与鉴定 张新明，张德武，庞旭，徐建，张丽蓉，魏玉珍，刘红宇，余利岩 【摘要】 进入 21 世纪，在天然产物中寻找抗结核新药 目的 研究链霉菌 CPCC 203702 中的抗结核分枝杆菌活 成为抗结核新药研发的热点之一[4] 。放线菌是产生 性次级代谢产物。 天然生物活性物质的重要微生物资源，在自然界中 方法 发酵液离心后，上清液经乙酸乙酯萃取、正相硅胶柱 分布广泛，目前已知的微生物来源的抗生素中，有 色谱、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱和半制备 HPLC 等方法 将近 70% 是由放线菌产生的[5] 。链霉菌属是放线 进行以抗耻垢分枝杆菌活性为导向的活性化合物分离纯化， 菌中产生抗生素种类和数量最多的类群，广泛分布 通过质谱和核磁共振波谱技术并结合文献数据进行化合物 于土壤、海洋、极端环境及生物体内[6] 。目前临床 结构鉴定；分别采用平板纸片法和阿尔玛蓝法检测目的化合 应用的抗生素约 2/3 来源于链霉菌属，如常见的抗 物的抗耻垢分枝杆菌以及抗结核分枝杆菌活性。 生素：链霉素、四环素、红霉素、卡那霉素等[7] 。 结果 从链霉菌 CPCC 203702 发酵液中分离到 1 个具有 本课题组在前期活性筛选中发现一株来源于 显著的抗结核分枝杆菌活性的伯尔尼霉素类化合物伯尔尼 青海省循化撒拉族自治县土壤中的链霉菌 CPCC 203702 ，其发酵液粗提物对耻垢分枝杆菌和结核分 霉素 C ，其抗结核分枝杆菌 MIC 为 2 μg/ml ；完成其核磁 数据的完整归属。 枝杆菌 H37Rv 具有良好的抑制活性，当粗提物终 浓度为 200 μg/ml 时，显示出良好的抗菌作用。以 结论 首次报道了伯尔尼霉素类抗生素具有显著的抗结核 抗耻垢分枝杆菌活性为导向，对该菌株的发酵液上 分枝杆菌活性，丰富了硫肽类抗生素的活性研究，也为抗结 清乙酸乙酯部分进行初步的次级代谢产物研究。 核药物的发现提供一个新的视角。 【关键词】 链霉菌属； 抗生素类，抗结核； 伯尔尼 1 材料与方法 霉素 C 1.1 材料 中国医药生物技术, 2015, 10(4):351-355 1.1.1 仪器 NU-425-400E 高压灭菌锅为日本 Hirayama 公司产品；超净工作台为美国 Nuaire 公 耐药结核病尤其是耐多药结核病（MDR-TB ） 司产品；生化培养箱为上海智城分析仪器制造有限 和广泛耐药结核病（XDR-TB ）发病率的不断上升 公司产品；R-215 旋转蒸发仪为瑞士 Buchi 公司产 使得结核病疫情再度严峻，成为全球必须共同面对