转基因小鼠的多重犘犆犚快速检测技术.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２００９４０２ １８５１９０ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 转基因小鼠的多重犘犆犚快速检测技术 王趁芳，李新云，王志伟，敖 红，崔文涛，李 奎 　 　 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 中国农业科学院家养动物 遗传资源与种质创新重点开放实验室，农业部转基因动物与 饲料安全鉴定检验测试中心，北京 １００１９３） 摘 要：转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持。采用碱裂解法快 　 速提取鼠尾基因组 ，用 方法检测其中的外源基因结构如 （ ）启动子、 终 ＤＮＡ ＰＣＲ ｃｔｏｍｅａｌｏｖｉｒｕｓ ＣＭＶ ｈＧＨ ｏｌＡ ｙ ｇ ｐ ｙ 止子及目的基因跨膜蛋白 （ ， ），筛选到阳性样品。优化了多重 引物退 ６６ Ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｒｏｔｅｉｎ６６ 犜犿犲犿６６ ＰＣＲ ｐ 火温度及缓冲液浓度，并探讨了扩增速率对多重 ＰＣＲ的影响。结果表明，此多重 ＰＣＲ方法可得到很好的扩增效 果，可用于转基因小鼠外源基因的检测，同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考。 关键词：转基因小鼠；多重 ＰＣＲ；检测 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ７８９ Ａ ０３６６６９６４２００９０２０１８５０６ 　　　　 　　　　 犕狌犾狋犻犾犲狓犘犆犚犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犈狓狅犲狀狅狌狊犌犲狀犲犻狀犜狉犪狀狊犲狀犻犮犕犻犮犲 狆 犵 犵  ， ， ， ， ， ＷＡＮＧＣｈｅｎｆａｎ ＬＩＸｉｎｕｎＷＡＮＧＺｈｉｗｅｉＡＯＨｏｎ ＣＵＩＷｅｎｔａｏＬＩＫｕｉ ｇ ｙ ｇ （ 犜犺犲犓犲 犔犪犫狅狉犪狋狅狉 狅 犇狅犿犲狊狋犻犮犃狀犻犿犪犾犌犲狀犲狋犻犮犚犲狊狅狌狉犮犲狊犪狀犱犌犲狉犿 犾犪狊犿 狔 狔 犳 狆 ， ， 犐狀狀狅狏犪狋犻狅狀狅 犆犃犃犛 犐狀狊狋犻狋狌狋犲狅 犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲 犆犺犻狀犲狊犲犃犮犪犱犲犿 狅 犃 狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾 犳 犳 狔 犳 犵 ， 犛犮犻犲狀犮犲狊犆犲狀狋犲狉 狅狉犐犱犲狀狋犻犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅 犜狉犪狀狊犲狀犻犮犃狀犻犿犪犾犪狀犱 犳 犳 犳 犵