甘薯糖蛋白的分离纯化和结构分析.PDF

华 南 理 工 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 32 卷 第 9 期 J ournal of South China University of Technology Vol . 32 　N o . 9 2004 年 9 月 (Natural Science Edition) September 　2004 文章编号 : 1000- 565X (2004) 09- 0059- 04 　 甘薯糖蛋白的分离 、纯化和结构分析 李亚娜 　林永成 　佘志刚 ( 中山大学 化学博士后流动站 , 广东 广州 510275) 摘 　要 : 采用二乙基氨基乙基 52 和葡聚糖凝胶 G100 柱层析法 , 从甘薯中分离纯化甘薯 糖蛋白, 并对其进行结构分析. 用 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳检验纯度和分子质量; 根据 β- 消除反应判断糖肽键的连接方式; 利用气相色谱法分析单糖组成; 通过红外光谱推断 糖苷键类型. 研究结果表明,甘薯糖蛋白是以共价键连接而成的结合蛋白, 呈白色粉末状 , 易溶于水 , 分子质量约为 62ku , 属 O - 连接方式 ,含有 β- 糖苷键和典型酰胺羰基结构, 蛋 白质含量为 12. 01 % ,糖链部分含有岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖. 关键词 : 甘薯糖蛋白; 分离; 纯化; 结构分析 中图分类号 : Q282 . 7 　　　　文献标识码 : A ( ) ( ) 　　糖蛋白 Glycoprotein 是一类由糖类同多肽或蛋 甘薯 Ip omaea . batatas LAM : 品种 “北 京 2 [ 1] 白质以共价键连接而形成的结合蛋白 . 其结合方 号”, 西南农业大学实验农场; 透析袋 : 美国 Sigma 式主要有两种 : ( 1) 糖和含羟基的氨基酸以糖苷形式 公司, 分子截量 1000u ; 二乙基氨基乙基 52 (D EA E - 结合 ,称为 O - 连接; (2) 糖和天冬酰胺基连接 , 称为 ) ( ) 52 纤维素 : Whatman 公司; 葡聚糖凝胶 Sep hadex N - 连接. 在生物体 内糖蛋白以不同的形式存在而 G100 :瑞典 Phamacia 公司; 硼氢化钠 :美国 Sigma 公 发挥作用 , 是细胞膜 、细胞间基质 、血浆 、粘液 、激素 司; 其它试剂均为化学纯或分析纯. 等的重要构成成分[2 ] . 日本营养学家最近发现甘薯 1. 2 　主要仪器与设备 中含有一种独特的粘蛋白, 具有抑制胆固醇在体内 L KB 自动柱层析系统; Beckman 高速冷冻离心 沉积 、增强