黑曲霉胞外β–葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究-天津科技大学学报.PDF

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黑曲霉胞外β–葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究-天津科技大学学报

第 30 卷 第 5 期 天津科技大学学报 Vol. 30 No. 5 2015 年 10 月 Journal of Tianjin University of Science Technology Oct. 2015 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510 黑曲霉胞外 β–葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究 徐 星,肖 华,黄琳琳,别松涛 (工业发酵微生物教育部重点实验室,工业酶国家工程实验室,天津市工业微生物重点实验室, 天津科技大学生物工程学院,天津 300457) 摘 要 :利用硫酸铵盐析、Superdex 200 凝胶柱层析等步骤 ,从黑曲霉发酵液中纯化得到两种 β– 葡萄糖苷酶蛋白,其 5 4 5 相对分子质量分别为 1.15 ×10 和 7.0 ×10 左右 ,比活力分别为 62.1,U/mg (相对分子质量约为 1.15 ×10 )和 4),纯化倍数分别为 1.54 和 1.31,回收率分别为 19.6%,和 19.1% ,β– 葡萄糖苷酶 53.0,U/mg (相对分子质量约为 7.0 ×10 2+ 2+ + 最适水解 pH 为 4.6 ,最适反应温度为 50 ~55,℃.在 pH 4.2 ~4.8 、温度 40 ~60,℃下均能保持稳定.Mn 、Mg 和 K 对 2+ 3+ 2+ 2+ 2+ + 2+ β– 葡萄糖苷酶有不同程度的激活作用,而 Ca 、Fe 、Zn 、Cu 和 Fe 会抑制 β– 葡萄糖苷酶的酶活,Na 和 Ba 对 β– 葡 萄糖苷酶活力影响不明显.以 pNPG 为底物时,该酶的 Km 和 vmax 分别为 2.33,mmol/L 与 3.14,mmol/ (L·min). 关键词 :β–葡萄糖苷酶;分离纯化;黑曲霉 中图分类号:Q814.1 文献标志码 :A 文章编号 :1672-6510 (2015)05-0015-05 Purification of β -glucosidase from Aspergillus niger an

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