长春地区引起婴幼儿肺炎的3、7型腺病毒分.PDFVIP

维普资讯 1I2 ^—单1．蠢 盘，嘲 Yiral~ltn |4mill 长春地区引起婴幼儿肺炎的3、7型腺病毒分 子流行病学研究 傅文永 梁东 郑永臣 刘为民 许忠 郭惠君 (白求思医再大学第一临康医院儿科．长春 13ou21) 袁 同福 (长春 市 旋药 广耐 究 日亍．长 春 l30071】 提 要 本文对长春地 区1976年--1988年引起小儿肺炎的I35株3．7型腺病毒核酸进行 了限惴性 内切蠢圈谱分析，绪果表明：75株 7型腺扁毒经BemHI，ell、BglI、XbeI、$maI． Hind1分析后表现为=个基因组型一7b和7d。其 中60栋 7b(88 )，流行于 1976--1988 年jI5株7d(I2嘶 )身1982年出现逐年增加，到1987一lq88年的s株都是7d。60株 3型腺 瘸毒被 lⅡ、BemH1分析后表现为三个基因蛆型，我们用3王、3Ⅱ、3Ⅲ代表它们，其中 56椿3I(93．3嘶 )流行于1976--1888年；3Ⅱ、3皿散在分布。 通过插床资科整理，发现该地区 3．7型腺病毒的不同基 因组型在毒力致病性上存在着 差瓤。 兰■一：腺病毒 基 因组型 限制佳内切酶 分子流行病学 腺瘸毒 3型 (Ad3)和 7型 (Ad7)是引起小儿肺炎的重要病原…。尤其在我国北方 冬季!舂染流行广，毒情严重，病死率高 “。为深入了解其发生、发展规律，为其防治提 供可靠的依据，我们对本地区连续十二年的135株Ad3和Ad7进行分子流行病学研究。 · 材 料 与 方 法 1． ●毒辟：选 自1976--1988年分离茸腺向毒肺炎患儿的咽拭子标本．Ad360株，Ad775株。 这些毒株均经 中和试验确定血清型别。将Ad3或Ad7标本接种于匣代人丘- 钿胞静止培养，病变 明 显 时再接种Hele细胞增殖，细胞病变_}+十一 {{}}时收获，置40℃冰箱待用 。 2． 卉●DNA曲抽撮：采用改良的聚乙二醇法——我们将提取 噬茁体DNA的方法加 以改进， 总结出一十从赔染细胞 中提取病毒DNA的方法．堇本步骤如下：①Ad3或 Acl7感染细胞反复冻融j ②室温2001)rim．10分钟；⑤ 上清渍加聚乙二醇和氯化钠；④窒温3O0Dr／皿．3O分钟；④沉淀的病毒颗 粒经蛋白酶、RNA酶处理 ；@有机溶剂抽提 ；0D A悬澈加无 啦乙醇，一7D℃l小对 ：@ 16~100r／m， l0分钟；⑨TE液 悬浮病毒DNA。 车支于1日B口年2月lo甘收到 维普资讯 ^●● 意 2．Iiii0 I,tS ,lrol~ il* SJsteo 3． ■●DNA■■性一切 ●蘸：限制 性 内切酶 BglⅡ、BglI、B~II、BamHI $maI、 XbaI、Hind~T均购于华美生物工程公司。酶反应条件按厂家说孵书进行。1昔规制备琼脂糖凝驶 ， 被酶解的病毒DNA点样于凝胶 电泳，XDNA的HindⅢ片段散标准府jI{l， 电压4V／era，时f~4--S小 时，用澳化 乙锭染色凝股，在短斌紫外线灯下观察 ，照像记录结果。