各功能室工作制度1细胞培养室工作制度细胞培养室由研究人员.DOC

各功能室工作制度 1. 细胞培养室工作制度 细胞培养室由研究人员和技术人员负责管理，具体指导临时工每周彻底清扫消毒一次，监测层流质量，每月作细菌培养一次（包括空气、物品），维护保养仪器设备，观察CO2培养箱温度、湿度、气体浓度是否正常，保管仪器零配件。 工作前半小时先启动空调机，然后打开层流室风机、超净台风机及紫外灯开关。紫外灯消毒时间以半小时为宜，不得无故延长时间。实验操作完毕后清理超净台、工作台台面，培养箱把手处、显微镜台面、超净台台面均用75%酒精擦拭消毒。离开实验室前先关空调机，然后关层流室风机。 在细胞培养室工作，必须严格遵守无菌原则。进培养室前洗手，在一更室换鞋，在二更室穿消毒隔离衣，戴口罩及帽子，风淋去尘，喷雾消毒手。 进入培养室的物品必须消毒，否则勿入。放入培养箱内培养器皿必须无菌，器皿外周可用75% 的酒精擦拭消毒。 缓冲间干燥箱只准存放消毒后的物品、器皿。水浴箱每周一换一蒸水一次，并加入新洁尔灭和亚硝酸钠。 进出培养室应及时关门。 2. 细胞库管理制度 细胞库由技术员负责管理。技术员负责检查细胞入库出库登记，负责每周一检查、添加液氮，所需液氮必须提前两天准备好。 细胞株、组织标本入库，必须注明使用者姓名、冻存物名称、数量浓度，经二人查对，按要求填写登记表，二人签字后冻存。细胞株、组织标本分罐保存。 每次复苏细胞、取组织标本，必须经二人查对入库登记资料，并进行出库登记签字。 细胞库只负责保存在本室进行研究工作人员所需的细胞、组织标本，外单位人员要求细胞入库，或索取本室保存的细胞株须经中心主任批准。 每年进行两次保存细胞株的清理工作，已毕业研究生或研究人员废弃的冻存细胞或组织标本，经本人同意，处理后销毁。 3. 细菌培养室工作制度 细菌培养室由技术人员负责管理，每周彻底清扫消毒一次，维护保养仪器设备，保管仪器配件。 工作前半小时开净化工作台层流排风、紫外灯开关，操作完毕后清理超净台、工作台台面，并用消毒液擦拭。 废弃的菌液、菌种及容器必须经煮沸消毒后，再丢弃。 4. 荧光显微镜室工作制度 荧光倒置显微镜室由技术员负责清洁卫生、仪器保养维护和零配件的保管，督促检查使用登记。 任何人使用荧光倒置显微镜需事先与技术员联系，学会操作方法后，才可单独使用。 使用荧光倒置显微必须登记使用起始时间，荧光显微镜不可频繁开关，每次使用持续时间最好不超过2小时，使用完毕后立即关灯，而且需等汞灯冷却后才可再次开灯，以防高压汞灯寿命缩短。 在使用过程中，如出现意外情况，应立即关掉汞灯，并通知仪器负责人。 每次使用荧光显微镜后都应将油镜头擦拭干净、切断电源、盖罩。 5. PCR室工作制度 PCR室由技术员负责保养维护仪器、保管仪器零配件、检查工作区清洁卫生。 进行PCR实验时，应严防扩增产物污染造成假阳性结果，故PCR准备工作、PCR扩增、PCR扩增产物的检测应分区进行。 PCR及逆转录PCR的预处理在准备间超净台上进行。 荧光定量PCR由技术员操作，其他人员不得自行开机。 6.电泳区工作制度 电泳工作区由技术员负责保养维护仪器、保管仪器零配件、检查工作区清洁卫生。 用微波炉煮胶时，应避免含溴化乙锭(EB)的凝胶煮沸后溢出污染托盘，如果溢出，必须立即清除干净，否则以损坏仪器论处。 电泳完毕后，及时清洗电泳槽。使用凝胶成像仪后，及时擦拭残留在暗箱内工作台面上的电泳液，以免腐蚀台面。 若需接触EB必须戴专用手套，凡被EB污染的物品禁止拿到非EB区，凡被EB污染的手套禁止接触非EB区的任何东西。废弃的含EB的凝胶必须放入指定的桶内，以便统一处理。 7.洗涤室工作制度 洗涤室由技术员负责管理，具体指导临时工制备一蒸水、正确使用高压锅消毒，定期配制、更换酸液。 需浸泡酸的玻璃、塑料器皿，必须清洗一遍，并晾干后用塑料网装好，然后浸入酸液内，浸泡时间不要超过48小时，若不及时取出，按无主处理。金属器皿禁止泡酸。细胞培养所需器皿与普通器皿分缸浸泡。 制备蒸馏水时，制备人员不得离开，注意在制备蒸馏水期间不得断水源，若突然停水，必须立即关掉电源，防止干烧损坏蒸馏仪。 高压消毒时，消毒人员不得离开，应严格掌握压力和时间，以保证灭菌效果，灭菌完毕后，必须待气压表的指针下降至“0”处，方可打开锅盖，以免发生危险。定期监测高压锅的灭菌效果。注意高压锅的保养工作，每日使用前洗刷一次，加足水，严禁干烧。 已消毒物品与未消毒物品应严格分开放置，避免混淆。 8.烤箱使用制度 烤箱由技术员负责管理，监督研究人员严格执行操作规程，注意安全，严防事故发生。 玻璃器皿高温烘烤时，必须有专人看管，不得用布类、纸类、塑料物品包裹，可用锡纸盖口。烘烤完毕后待烤箱温度下降至40℃以下，方可开箱取物，以防热玻璃器皿遇冷空气爆裂。 塑料、橡胶、布类、纸类物品只能用低温烤干，烤箱温度