生物固氮译丛二 刘中柱.pdfVIP

生物固氮 K. T. Shanmugam F.. OGara K. Andersen R C. Valentine 引 百 占 只有细菌和蓝藏进化形成了固氮能力。固氮是由一连串叫做Nif基因操纵的过程。 在自生细菌一一肺炎克民杆菌 ( Klebsiella pneumoniae) 中， 固氮基因已得到详细肯定。 像克氏杆菌这类自生细菌，能使固氮酶产生的NH，+与细胞的生物合成相结合，而不 使任何可检出的NH，+输进生长培养基F如果环境中存在结合氮〈例如NHJ或NO - ) ，菌 a 体就不会合成固氮酶。与此相反，像根瘤菌( Rhizobium spp.) 这类能在豆科植物根部形 成根瘤的共生细菌，其固氮基因通常被去阻遏〈甚至在NH，+存在下也有固氮酶活性)，而 导致结合态氮的合戚，并将之揄往外部环境(以根瘤菌言则输到寄主植物细胞的细胞质中 去)。也就是说，固氨基因 (Nif)的去阻遏导致了大量大气氮被固定，这在全球规模的人 类食物链中起着决定性的作用。 目前有好些证据说明，遗传机制也像生物化学机制那样，可能对于被固定氮产物的合 成以供细胞需要是有作用的。本文阐述自生细菌和共生细菌固氮过程中调节作用的现代概 念。 固氮基因的去阻遏 本节将论述肺炎克民杆菌固氨基因的控制和表达的最新进展，着重论述固氮酶去阻遏 的突变型菌株，该菌株会输出大量结合态氮。 肺炎克民杆菌把固氮生成的氨(通过谷酷股合成酶和谷氨酸合成酶〉同化到谷氨酸的 水平。曾发现NH，+或氨基酸能阻遏固氮酶的生物合成，然而，氨基酸的阻遏效应和细胞 (通过内部代谢〉生成的NH，+的阻遏效应难以区别。由于固氮去阻遏的突变型菌株在NH，+ 存在下也能合成固氮酶，因而这个问题却是可以解决的。对这些菌株的研究表明，NH， + 的 阻遏性能与细胞能把NH，+转化到谷酷股和谷氨酸的水平有关。从本质上说，这些实验表 明了固氮酶是在NH，+不被同化成氨基酸的条件下生成的，每当NH，+被同化到氨基酸的水 平时，固氮酶的生成总是被阻遏。 以缺乏谷氨酸合成酶活性的突变菌株( Asm- )为亲本，分离并描述了肺炎克氏杆菌 的三类固氮酶去阻逼的突变菌株〈见表1)。这些菌株的生化分析表明，其中一类突变型 〈例如菌株SK- 24， SK-28 和SK-29)能够形成谷酷股合成酶活性， 但不具谷氨酸脱氢酶 • 1 • 羡 1 肺炎宽氏梓菌去阻遏突变体的固氮 ( Ni f) 性质 谷氨酸脱氢酶 谷m胶合成酶 分泌的 NH，+ 固时氮每 酶 (微克分子/小毫克蛋白质〉 〈纤克分子/分钟每毫克蛋白质) {微克分子/毫 商 株 一 NHJ +NHJ -NHJ +NHJ -NH,+ +NHJ 克蛋白质〉 M5A1 4.04 0.00 878 229 5 126 Asm--j 3.14 0.00 653 147 18 116 SK-24 2.