减毒麻疹病毒诱导jec凋亡及其机理-免疫学专业论文.docxVIP

遵义医学院硕士研究生学位论文 遵义医学院硕士研究生学位论文 减毒麻疹病毒诱导JEC凋亡及其机理 减毒麻疹病毒诱导JEC凋亡及其机理 研究生：王春艳 导师：吴中明教授 摘要 【目的】：探讨减毒麻疹病毒(Mv)感染的子宫内膜腺癌细胞(JEO的凋亡情 况及相关机制。 【方法】：用不同稀释度(1：lo、l：20、1：40、l：80)的Mv感染JEC，采 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mv对细胞增殖活力的影响；经HE染色、琼脂 糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测细胞凋亡情况；通过免疫细胞化学法，观察 MV感染JEC细胞的Fas、FasL及TGF—B表达情况，分析凋亡机制。 【结果】： (1)病毒感染后，MTT结果显示：MV对JEC细胞的生长表现为先促进 后抑制，最终导致细胞的凋亡或坏死，且其促进或抑制作用与病毒的感染时间 (P(O．01)和感染浓度有关(P(O．05)。(2)JEC细胞感染病毒后，形态学上出现细 胞的胞浆减少，核染色质浓缩、边集，以及碎裂等凋亡变化；琼脂糖凝胶电泳出现凋 亡的特征性DNA“Ladder”条带：流式细胞术结果显示：JEC细胞的凋亡率与『F常对 照组相比都有不同程度的升高(P(0．05或尺O．01)，随着感染时间的延长，细胞的 凋亡率有增加的趋势(P(0．05或P(0．01)，12d时，感染浓度与凋亡率呈正相关 (PO．01)，在DNA含量的测定中，出现了凋亡典型的亚二倍体峰。(3)免疫组化结 果表明：MV感染后JEC细胞内Fas及TGF—B的表达增强(PO．01)，而FasL始终未 表达。 【结论】：MY能够诱导JEC细胞的凋亡，此作用与病毒浓度以及感染时间有关， 其机制可能与Fas、TGF一0的表达有关。 【关键词】：减毒麻疹病毒；子宫内膜腺癌细胞系(dEC)；细胞凋亡：Fas： FasL：TGF．B 整墨堕堂堕堡主塑窒竺堂堡堕壅 整墨堕堂堕堡主塑窒竺堂堡堕壅 壁童壁堡堕至至量!堕塑圭垦茎垫堡 The Apoptosis and Apoptotic Mechanism of JEC Induced by Measle Virus Master Tutor Prof．Wu Zhongming Master Candidate Wang Chunyan ABSTRACT [Objective]：To study the apoptotic effects and mechanism ofinfection with measle vaccinal virus on the JEC cells． [Methods]：Cultured JEC cells were infected with different dilute centrations of measlevaccinalvirus(1：10、1：20、1：40、1：80)，thentheproliferationabilities of JEC cells affected by measle vaccinal virus is examined by MTT；the effects of apoptosis were detected using the following methods：the HE staining；DNA agarose gel electrophoresis，Annexin—V FiTC／PI stained FCM；the examination of DNA by FCM；the expressions of Fas．FasL and TGF—B of JEC were examined by immunoc”ochemicaI staining． [ResuIts]：(1)After infection，the results of MTT showed：MV promoted the pro ．1iferation abilities ofJEC cells，first，then inhibited，at last induced the JEC cells to apopto —sis or to death．the promoting and inhibiting abilities were related to time(氏0，01)and concentrations infected(P0．05)．The apoptotic JEC cells showed changes ofmorphology cytoplasm decreasing and chromatin condensation；ladder-