减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A的安全性及其免疫生物学特性研究-预防兽医学专业论文.docxVIP

刘海侠减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A的安全性及其免疫生物学特性研究 刘海侠减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A的安全性及其免疫生物学特性研究 l 减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A的安全性及其免疫 生物学特性研究 学科专业预防兽医学 研究生 刘海侠 导 师王宝安教授 焦新安教授 摘要 对接种减毒鸡沙门氏菌疫苗株97A鸡的病理组织学与细菌学动态变化进行研 究，同时观察该疫苗株的免疫生物学特性，以进一步评价疫苗株97A的安全性和 免疫保护作用，为该疫苗的推广应用奠定基础。 用疫苗株97A口服接种1．14日龄试验鸡，免疫后1．35d定时分批扑杀，通过 观察其临床症状、大体病变、病理组织学变化和细菌学检查，以评价疫苗株97A 的安全性。结果，试验鸡在接种疫苗株97A后35天的试验期内全部健活，无明 显临床症状，剖检无肉眼可见病变，组织学检查表明，肝脏、肾脏等实质器官仅 有轻度的水泡变性和(或)脂肪变性及轻微的炎性反应。免疫鸡血液细菌分离结 果均为阴性，但可从其脾脏和肝脏中分离到疫苗株97A，该菌在鸡体内至少定居 28天。试验结果表明，疫苗株97A对1．14日龄试验鸡有较好的安全性。 用鸡沙门氏菌强毒株S99对疫苗株97A免疫鸡进行攻击，对免疫攻毒组和攻 毒对照组鸡进行病理学检查和细菌分离。结果，三组免疫鸡均表现较好的保护率， 1日龄免疫鸡存活85％、7日龄免疫鸡存活95％、14日龄免疫鸡存活100％，而攻 毒对照组鸡仅存活l 5％；统计学分析表明，三组免疫鸡与攻毒对照鸡存活率差异 显著。 免疫攻毒组鸡肝脏、肺脏和肾脏等实质器官可观察到散在的小坏死灶和 (或)轻到中度的炎性反应：而攻毒对照组鸡表现了禽伤寒(FT)的特征性病变： 肝细胞严重变性坏死，后期有纤维素渗出，嗜异白细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润， 并取代交性、坏死的肝细胞。免疫攻毒组鸡血液细菌分离结果为阴性，但可从该 扬州大学硕士学位论文组鸡肝脏和脾脏中分离到强毒株；攻毒对照组鸡血液、肝脏和脾脏中都可分离到 扬州大学硕士学位论文 组鸡肝脏和脾脏中分离到强毒株；攻毒对照组鸡血液、肝脏和脾脏中都可分离到 大量强毒菌。结果表明，疫苗株97A能明显地限制强毒株在鸡体内的定居和增殖， 对试验鸡表现出很好的保护性。 最后。通过流式细胞仪对口服接种疫苗株97A鸡的血液和脾脏T淋巴细胞数 量变化进行检测，结果，免疫后第10d鸡脾脏中CD4+T细胞数量增多，而免疫后 第15d鸡脾脏中CD8+T细胞增多。 研究结果表明：疫苗株97A可在1．14日龄免疫鸡体内复制、定居，不产生菌 血症，对试验鸡有较好的安全性；免疫攻毒组鸡表现出较高存活率．分别为85％、 95％、100％，三组鸡仅观察到轻到中度的组织损伤，其肝脏和脾脏中可分离到强 毒株，但在机体获得的免疫保护作用下，强毒可被机体清除，因此疫苗株97A具 有很好的保护性。流式细胞仪检测结果表明，该疫菌株可在一定程度上激发机体 的T细胞免疫应答反应，以限制强毒株在鸡体内的定居和增殖。 关键词：减毒鸡沙门氏菌，安全性，保护效率，病理组织学变化，流式细胞 术。 !!堡堡堡堡璺鲨塑垦堕壅堕堡!!!塑壅全堡墨堡墨垄圭塑堂塑丝堕塞 !!堡堡堡堡璺鲨塑垦堕壅堕堡!!!塑壅全堡墨堡墨垄圭塑堂塑丝堕塞 一3 Safety and Immunogenicity of Attenuated Salmonella Gallinarum Vaccine Strain 97A in Chickens M．S Candidate：Haixia Liu Advisor：Prof．Baoan Wang Prof．Xinan Jiao Abstract In order to develop attenuated Salmonella gallinarum strain 97A as vaccine， pathologic and bacteriologic dynamics in chickens inoculated、Ⅳitll strain 97A Was investigated，the safety and efficacy of the vaccine strain to protect chickens against Salmonellosis caused by virulent S．gallinarum strain S99 Was evaluated while its immunobiological properties were also preliminary demonstrated． To evaluate the safety of strain 97A，Salmonella-free chickens were immunized orally with 5x108 CF