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卡尔文循环的发现
美国加州大学放射化学实验室的卡尔文(M.Calvin)和本森(A.Benson)等人利用小球藻、栅列藻等植物研究光合作用。1946年,他们采用了两项新技术:(1)14C同位素标记与测定技术(可排除原先存在于细胞里的物质干扰,凡被14C标记的物质都是处理后产生的);(2)双向纸层析技术(能把光合产物分开)。
当他们用单细胞绿藻作14CO2示踪实验时,在光照几秒钟后,用乙醇停止酶的反应,以双向纸层析分离放射性产物,发现C-14标记在3-磷酸甘油酸的羧基上,进一步研究发现CO2与1,5-二磷酸核酮糖缩合成6碳化合物,然后迅速裂解形成二分子3-磷酸甘油酸。催化这反应的酶是1,5-二磷酸核酮糖羧化酶—合氧酶(ribulose disphosphate carboxylase oxygenase 缩写为rubisco)。这个酶位于类囊膜上朝基质一侧。在叶绿体中此酶的含量十分丰富,大约是总蛋白量的60%。
图1 研究光合作用所用装置
经过10多年周密的研究,卡尔文等人终于探明了光合作用中从CO2到蔗糖的一系列反应步骤,推导出一个光合碳同化的循环途径,这条途径被称为卡尔文循环或卡尔文本森循环(图2)。由于这条途径中CO2固定后形成的最初产物PGA为三碳化合物,所以也叫做C3途径或C3光合碳还原循环(C3 photosynthetic carbon reduction cycle, C3PCR循环),并把只具有C3途径的植物称为C3植物(C3 plant)。
图2 卡尔文循环图解
备注:
选用小球藻等单细胞的藻类作材料,藻类不仅在生化性质上与高等植物类似,且易于在均一条件下培养,还可在试验所要求的时间内快速地杀死。
问题:
1、卡尔文等人研究光合作用用了哪些新技术?
2、在用单细胞绿藻作14CO2示踪实验时,被标记的C依次出现在了哪些化合物上?这说明了什么问题?
答案:
1、卡尔文等人利用了(1)14C同位素标记与测定技术;(2)双向纸层析技术两项新技术。
2、在用单细胞绿藻作14CO2示踪实验时,被标记的14C 依次出现在了1,5-二磷酸核酮糖、3-磷酸甘油酸、3-磷酸甘油醛、葡萄糖。14C出现的先后顺序说明光合作用暗反应化合物形成的先后顺序。
本案例的使用说明:
光合作用是生物界最重要的新陈代谢之一,本案例通过实验旨在说明光合作用的暗反应过程。
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