遗传重组的分子机制.ppt

上一章主要内容回顾 几个主要的概念： 转化 转导 普遍性转导 局限性转导 流产转导 第八章 遗传重组 第一节 同源重组 交叉理论（chiasmatatype hypothesis） 1909年，Janssens提出； 断裂和重接模型 1937年，Darlington提出； 模板选择学说（copy choice ） Belling J.首先提出，1933年又撤回； 1948年，Hershey再次提出； Holliday模型 1964年Robin Holliday提出； 断裂重接模型和模板选择复制模型存在的问题 断裂重接模型：不能解释基因转变和极化子现象； 模板选择复制模型： (1) 违背了半保留复制； (2) DNA复制在S期，重组在偶线期，不应同时发生； (3)不能解释3线和4线交换； 交叉理论（chiasmatatype hypothesis） 1909年，Janssens提出； 断裂和重接模型 1937年，Darlington提出； 模板选择学说（copy choice ） Belling J.首先提出，1933年又撤回； 1948年，Hershey再次提出； 霍利迪(Holliday)模型 1964年Robin Holliday提出； 支持Holliday遗传重组模型的证据： 1、形态学上，Holliday中间体(Chi 结构)的电镜照片； 支持Holliday遗传重组模型的证据： 1、形态学上，Holliday中间体(Chi 结构)的电镜照片； 2、异源双链形成时，产生碱基错配导致与重组相关联 的基因转变的发生； (三)、基因转变及其分子机理 1、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌： pdxp：酸度敏感的VB6依赖型 pdx： 酸度不敏感的VB6依赖型 (三)、基因转变及其分子机理 1、异常分离与基因转变 粗糙脉孢菌： pdxp：酸度敏感的VB6依赖型 pdx： 酸度不敏感的VB6依赖型 + pdxp × pdx + 2、基因转变的分子机制 Holliday 模型中为对称的杂合双链，而实际情况有不均等分离现象，1975年Meselson-Radding 提出模型解释这种不对称重组现象； 负干涉：两个邻近基因，或者是同一基因不同突变点间，双交换的频率比预期高，并发系数C1，即一个区域的交换引起邻近区域交换的增加； 局部负干涉：有些噬菌体、细菌或真菌的某些局部位点明显的出现负干涉的现象； (一)、细菌同源重组的特点 ①发生在环状双链DNA分子与一个双链或单链DNA 分子之间； 转化：单链 × 双链 接合：双链 × 双链 转导：双链 × 双链 ②存在8个碱基组成的重组热点(Chi位点) [E.coli 5-10Kb]： chi 位点 5 GCTGGTGG 3 3 CGACCACC 5 ③需要几种重要的蛋白质： RecBCD复合体：具有核酸酶，解旋酶和ATPase活性，在 Chi位点产生单链 3游离未端； RecA：促进DNA单链的同化，即促进单链与同源双链分子发生链的交换； RuvAB复合体：促进分支迁移； RuvC：核酸内切酶，切开重组中间体(Holliday连接体)； 实质：单链DNA片段与双链环状DNA之间的重组 ①切除外源DNA——无重组 ②切除受体DNA——发生重组 ③无修复作用 ——子代细胞出现两种基因型（受体基因型 和重组体基因型） 通常采用有利于重组体基因型生长的选择条件 O: 15bp(核心)；富含A-T P: -160 bp ~ 0 P: 0 ~ 80bp Holliday 模型中，由于重组而产生的异源双链区存在不配对碱