新型戊二酸胆固醇单酯脂质体的制备及其与H22细胞疫苗的耦联.PDF

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１０，４１（５）：４４１－４４６ ４４１ 新型戊二酸胆固醇单酯脂质体的制备 及其与Ｈ２２细胞疫苗的耦联 １ ２ １ ２ 程　娟 ，胡向兵 ，平其能 ，刘景晶 １ ２ （中国药科大学　 药剂学教研室；生命科学技术学院酶工程实验室，南京２１０００９） 摘　要　制备能够与细胞疫苗耦联的新型戊二酸胆固醇单酯脂质体，用作疫苗的载体和佐剂，并研究其贮存稳定性及 其最佳耦联条件。以戊二酸酐和胆固醇为原料合成戊二酸胆固醇单酯，再以其为原料与磷脂制备戊二酸胆固醇单酯脂质 体，采用薄膜分散法制备脂质体，以粒径及多分散指数为指标优化脂质体处方，制得粒径在 １５０～２００ｎｍ之间的戊二酸胆 固醇单酯脂质体。对脂质体的稳定性和贮存条件进行研究，结果表明冻干脂质体在－２０℃可至少保存１２个月。以耦联率 为指标，对影响戊二酸胆固醇单酯脂质体与Ｈ２２细胞疫苗耦联的相关因素进行优化，试验结果表明，复溶后加入ＥＤＣ活化 １０ｍｉｎ，再加入Ｈ２２细胞疫苗和ＳＮＨＳ孵育３ｈ，得到耦联率为８１４％的Ｈ２２细胞疫苗脂质体耦联物。 关键词　戊二酸胆固醇；戊二酸胆固醇单酯脂质体；Ｈ２２细胞疫苗；耦联 中图分类号　Ｒ９４４；Ｒ９７９５　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１０）０５－０４４１－０６ ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｉｐｏｓｏｍｅａｎｄｉｔｓｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎｗｉｔｈＨ２２ ｃｅｌｌｖａｃｃｉｎｅ １ ２ １ ２ ＣＨＥＮＧＪｕａｎ牞ＨＵＸｉａｎｇｂｉｎｇ牞ＰＩＮＧＱｉｎｅｎｇ 牞ＬＩＵＪｉｎｇｊｉｎｇ １ ２ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ牷ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＥｎｚｙｍｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ牞ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓａｒｅｏｆｐｏｔｅｎｔｉａｌｕｔｉｌｉｔｙｉｎｖａｃｃｉｎｅａｓｔｈｅｃａｒｒｉｅｒａｎｄａｄｊｕｖａｎｔ．Ｔｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｔｏ ｐｒｅｐａｒｅｎｏｖｅｌｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｉｐｏｓｏｍｅｓｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｂｅｃｏｎｊｕｇａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｖａｃｃｉｎｅ牞ａｎｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅ ｓｔｏｒａｇｅａｎｄｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｌｉｐｏｓｏｍｅｓ．Ｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｗａｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｕｓｉｎｇｇｌｕｔａｒａｔｅａｎｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｔｈｉｎｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ牗ＴＬＣ牘牞ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ牗ＭＳ牘ａｎｄｅｌｅｍｅｎｔａｌａｎａｌｙｓｉｓ．Ｂａｓｅｄｏｎ ｔｈｅｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｌｏｅｓｔｅｒｏｌａｎｄｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ牞ｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｉｐｏｓｏｍｅｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｕｓｉｎｇｔｈｉｎｆｉｌｍ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ牞ａｎｄｔｈｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｉｐｏｓｏｍｅｓｗａｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｒｅｇａｒｄｉｎｇｔｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅａｎｄｐｏｌｙｄｉｓｐｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔａｎｔｇｌｕｔａｒｙｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｌｉｐｏｓｏｍｅｓｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｈａｖｅｔｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｏｆ１５０ ２００ｎｍ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ牞ｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｏｐｔｉｍｉ