健脑安保护血管性痴呆大鼠海马神经元损伤的神经内分泌免疫网络机制研究-中医内科学专业论文.docx

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 1．背景 脑缺血诱导神经内分泌免疫网络紊乱是缺血性神经损伤的重要机制，缺血后海马CRF神 经元激活与CRF释放可能是海马神经细胞迟发性死亡的关键因素。 2．目的 I；l缺血再萄群州蛭恕擀彬啵网络相关蛋白和越删蝴靶电，够酬缺血再灌海马神搿剥哟分子 机制，探枷蝴勰狮妒神蝴㈣靶点。 3缓谢 脑缺血再灌昏群}神经P蝴港境疫网络(NEI)紊刊是导黼神经硼缸唆幽雠=白勺分羽商理胡． 铫补肾晤血化痰法对m网络具有凋节作用。 4．方法 大鼠灌胃给健脑安5天后，进行MCAO，在再灌211、6h和24h各时闻点进行以下评价： (1)采用神经病理染色技术，观测再灌各时点海马和皮质病理形态学变化，定性与定量 分析损伤程度。 (2)采用免疫组化技术，半定量分析再灌各时点海马功能蛋白ChAT蛋白和Syn膜蛋白表 达。 (3)采用免疫组化技术，半定量分析再灌各时点海马CRF、PKC、Bcl-2／Bax蛋白表达。 (41采用RT-PCR技术，半定量分析再灌2h时海马CRFmRNA、CRF-RlmRNA表达。 分别采用脑室内注射CRF拮抗荆和都可喜灌胃对照。 5．结果 5．1健脑安对MCAO模型大鼠海马神经元损伤病理形态学变化的影响 再灌后2h、6h和24h时，光镜可见各组大鼠海马神经细胞形态基本正常；电镜可见模 型大鼠海马神经元超徽结构明显水肿。再灌时问延长水肿加重。中药组海马神经元水肿减轻， 与对照组比较无显著差异。 5．2健脑安对MCAO模型大鼠海马神经元功能蛋白表达的影响 再灌后2ll、6ll和24h时模型大鼠海马ChAT蛋白和Syn膜蛋白阳性表达面积较假手术 组明显减少(P0．01)，再灌时间延长模型组阳性表达面积进一步减少。 再灌24h时中药组大鼠海马ChAT蛋白和Syn膜蛋白阳性表达面积明显高于模型组 (P(o．01)。中药组与两对照组比较无差异口o．05)。 5．3健脑安对MCAO模型大鼠海马CRF、PKC、Bd-2／Bax蛋白表达的影响 ①再灌2h、6ll和24h时，模型大鼠海马CRY、PKC、Bcl-2／Bax蛋白阳性表达面积显著 高于假手术组(P如．01或P0．05)，随着再灌时闻延长模型组蛋白表达面积明显增加口o．01 ! ! 健脑塞堡塑鱼篮：睦疸墨盍鼠龌呈控经丞抵笾鲍控经由盆进簋痤匾终扭劐班盔 或P0．05)。 ②再灌弛时，中药组CRF蛋白阳性表达面积明显低于模型组(P0．05)；再灌曲和24tl 时，中药组CRF，PKC，Bax蛋白阳性表达面积明显低于模型组(P如．Ol或P0．05)。再灌6ll 和24h时，中药组Bcl-2蛋白阳性表达面积明显高于模型组∞0．05)。 ③再灌24h时，中药组CRF、PKC蛋白阳性表达面积明显高于CRF拮抗荆组口如．05)， 中药组与对照组在其它各时间点CRF、PKC、Bcl-2／Bax蛋白表达阳性面积比较无明显差异 rP0．05)。 5．4健脑安对McAo模型大鼠海马CRFmRNA、CRF-RlmRNA表达的影响 ①模型大鼠海马CRF mRNA表达高于假手术组(P0．05)，海马CRF-R mRNA表达高于 假手术组(Po．05)； ②中药组海马CRFmRNA、CRF-RmRNA表达-9对照组比较无明显差异①0．05)。 6．结论 6．1 MCAO模型大鼠海马神经元迟发性损伤机制可能与神经内分泌免疫网络CRF蛋白、 CRFmRNA、PKC蛋白、促调亡Bax蛋白高表达，与抗凋亡Bcl-2蛋白低表达有密切关系。 6,2缺血诱导的CRF高表达可能通过激活信号蛋白PKC而导致Bcl-2／Bax凋亡蛋白的表达 异常，从而启动海马神经元迟发性损伤。 6．3健脑安对缺血海马神经元的保护作用可能与下调神经内分泌免疫网络CRF蛋白及基因 表达、下调PKC信号蛋白袁达，调节Bcl-2／Bax凋亡蛋白表达有关。 关键词：缺血再灌大脑中动脉梗塞神经内分泌免疫网络促肾上腺皮质激素释放因子健 脑安中医药疗法神经保护海马 英文摘要Background 英文摘要 Background The disturbance ofthe network ofneuro-endocrine and inlnlllne fNEI)induced by cerebral ischenfia-reperfusion was Olle imporUtnt mechanism of injury of nerve induced by ischemia,the activation of CRF nel．Lron and release of CRF in hippocampus may be the key factors of delayed neuron death in hippocampus． Obje