基于多指标指纹图谱及抗氧化活性的巴西绿蜂胶研究-特种经济动物饲养专业论文.docxVIP

摘要蜂胶(Propolis)是西方蜜蜂(么p括mellifera)采集植物树脂分泌物并混入自 摘要 蜂胶(Propolis)是西方蜜蜂(么p括mellifera)采集植物树脂分泌物并混入自 身上颚腺、蜡腺等分泌物加工混合而成的胶状固形物。蜂胶的化学成分复杂，是 多成分、多靶点的复杂体系，具有抑菌、抗氧化、抗炎、免疫调节以及抗肿瘤等 多种生物学活性，广泛应用于医药、保健及日化等领域。 胶源植物是影响蜂胶化学成分及生物学活性的重要因素。在巴西东南部及中 西部地区，来源于酒神菊属植物(Baccharis)的巴西绿蜂胶因其独特的化学成分 及强效的保健功效在世界蜂胶市场上备受追捧。大量研究表明，巴西绿蜂胶显著 的抗炎、抗肿瘤、护肝、神经保护及调节血糖血脂等活性都与其抗氧化作用有关。 而蜂胶的抗氧化活性是其多种化学成分相互作用的整合结果，这是蜂胶的优势， 但同时也给蜂胶的质量控制造成了极大的困难。 因此，本研究采用分光光度法、高效液相色谱／电喷雾一质谱法(HPLC—ESI． MS／MS)以及离线HPLC．DPPH法，对巴西绿蜂胶的化学成分及抗氧化活性进 行了测定：建立了巴西绿蜂胶的化学指纹图谱，确定了共有成分峰，同时对特征 性化学成分进行定量测定：并筛选评价了巴西绿蜂胶的抗氧化活性成分，建立了 抗氧化活性指纹图谱。本研究对巴西绿蜂胶的质量控制以及抗氧化活性研究具有 重要意义。具体研究内容与结果如下： 1．首先对巴西绿蜂胶的多酚类化合物及抗氧化活性进行了初步评价。采用 分光光度法测定了22个不同批次巴西绿蜂胶中总黄酮、总酚酸的含量，同时对 其DPPH自由基清除活性进行了测定，并考察了两者的相关性。结果表明，不同 批次绿蜂胶中总黄酮含量相对较低，而总酚酸含量相对较高；DPPH自由基清除 活性与总酚酸含量呈现显著的正相关，而与总黄酮含量无显著的相关性。 2．优化建立了不同批次巴西绿蜂胶的高效液相色谱指纹图谱，确定了巴西 绿蜂胶的共有化学成分。并进一步采用电喷雾．质谱法对巴西绿蜂胶的指纹图谱 进行了定性分析，结合已有标准品及文献资料初步确认了其中14个多酚类化合 物，其中4个黄酮类化合物，10个酚酸及其酯类化合物。 3．建立了巴西绿蜂胶中9个特征性化学成分(绿原酸、咖啡酸、p．香豆酸、 3，5．二咖啡酰奎宁酸、4，5．二咖啡酰奎宁酸、3,4，5．三咖啡酰奎宁酸、山奈酚、山 万方数据 奈素及阿替匹林C)含量检测的反向高效液相色谱法。结果表明，阿替匹林C 奈素及阿替匹林C)含量检测的反向高效液相色谱法。结果表明，阿替匹林C 是巴西绿蜂胶中含量最为丰富的多酚类化合物，咖啡酰奎宁酸类化合物也是其主 要的特征性成分；不同批次绿蜂胶化学组成基本相同，而含量上存在差异。 4．采用离线HPLC—DPPH法研究了巴西绿蜂胶的抗氧化活性成分，同时结 合多变量相关性分析筛选评价了巴西绿蜂胶的抗氧化物质基础。结果表明，咖啡 酸、绿原酸、3，5．二咖啡酰奎宁酸、4，5．二咖啡酰奎宁酸、3,4，5。三咖啡酰奎宁酸、 山奈酚、山奈素、桦木酚及阿替匹林C是巴西绿蜂胶中主要的抗氧化活性成分。 关键词：巴西绿蜂胶；质量控制；化学指纹图谱；抗氧化活性；离线高效液相色 谱．DPPH法；抗氧化指纹图谱 万方数据 ABSTRACTPropolis ABSTRACT Propolis is resinous substance collected by Ap／s mellifera from leaf buds and cracks in the bark of various plants，and then mixed with the secretions of mandibular gland and wax gland．Propolis is complex mixture with multi-components and multi-targets，which possesses various biological activities，such as antibacterial， antioxidant，anti—inflammatory,immunomodulatory and antitumor,and has been widely used in pharmaceuticals，health food and daily chemical products． The chemical composition and biological activities of propolis mainly depends the plant origins．In the southeast and mid—west Brazil，Brazilian green propoli