碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的人晶状体上皮细胞增殖及移行作用的研究-眼科学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 2 Ningxia Medical University Thesis for Application of Master’s Degree Effect of basic fibroblast growth factor on proliferation and migration in cultured human lens epithelial cells in vitro Student’s Name: Ha Ling Fang Supervisor：Sheng Xun Lun Assistant supervisor: Subject Category: Medicine Major: Ophthalmology Specialty: Hereditary eye diseases School: Ningxia Medical University Completion Date: April. 2011 宁夏医科大学学位论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进 行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明 引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品 成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名＿＿＿＿＿ 论文导师签名＿＿＿＿＿ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明 宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有 关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁 夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公 布（包括刊登）论文的全部或部分内容。 （保密论文在解密后应遵守此规定） 论文作者签名＿＿＿＿＿ 论文导师签名＿＿＿＿＿ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要 宁夏医科大学硕士研究生学位论文 中文摘要 I I 碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的 人晶状体上皮细胞增殖及移行作用的研究 摘 要 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF） 对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells ，hLECs）促增殖及促 移行作用的影响。初步探讨 bFGF 对后发性白内障（posterior capsule opacification, PCO）发生、发展中的作用机制，为 PCO 的防治提供新思路。 方法 1.选择人晶状体上皮细胞株（SRA01/04）进行传代培养，观察细胞形态，选 择 3-5 代细胞用于实验。2.在无血清培养液培养的 hLECs 中分别加入不同浓度的 bFGF (0.01、0.10、1.00、10.00 及 100.00μg/ L)，继续分别培养 24h、48h、72h 后，四甲 基偶氮哇盐（4-methyl thiazolyl tetrazolium MTT）比色法测定 bFGF 促细胞增殖的 情况；3. 流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测细胞周期：选择能稳定促进 hLECs 增殖作用的 bFGF 中等浓度 10μg/L, 分别作用 hLECs 24h、48h 后流式细胞仪分析细胞 周期的改变；4.建立 hLECs 损伤愈合模型,观察不同终浓度 bFGF(0.01、0.10、1.00、10.00 及 100.00μg/ L)，作用 hLECs 24h 后 hLECs 的移行情况。 结果 1.MTT 法显示：bFGF 实验组浓度为 0.1μg/L、1.00μg/ L、10.0μg/ L、100.00 μg/ L 时，对 hLECs 细胞均有明显的促增殖作用，各实验组与阴性对照组比较差异具有 统计学意义((P0.05 或 P0.01)，且作用强度呈浓度依赖性,bFGF 浓度为 100.00μg/ L 作用 hLECs 24h 时，促增殖效果最大（P0.01）；2.流式细胞仪分析：实验组 bFGF 浓度 为 10μg/L 作用 24h、48h 后，与阴性对照组相比，实验组 hLECs 细胞周期发生明显改 变，表现为 G0/G1 期细胞显著减少，S 期和 G2/M 期细胞增多，差异有显著性（P＜0.05）， 说明 bFGF 通过促进 hLECs 细胞越过 G1 期限止点进入增殖状态；3.bFGF 浓度 1.00μg/ II II L、10.0μg/ L、100.00μg/ L 作用 hLECs 24h,可明显促进 hLECs 的移行,其移行