间充质干细胞驯化的巨噬细胞在脓毒症肺损伤中的作用及机制研究-儿科学专业论文.docxVIP

浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 致谢 致谢 本论文是在导师舒强教授的悉心指导下完成的。在攻读研究生的日子里，自 己所取得的点滴成绩都离不开恩师在学术上的指导和生活上的关怀。导师广博的 学识、严谨的治学、深厚的学术造诣和对科学研究敏锐的洞察力都让我受益匪浅， 将对我今后的工作和生活产生深远的影响。在此，学生谨向导师表示由衷的感谢 和深深的敬意。 感谢整个研究小组的各位老师和同学对我的帮助和关怀。从课题选题、实验 设计直到论文撰写无不倾注导师的心血和汗水，离不开研究小组各位老师的指导 和帮助，各位同学的辛勤工作和交流合作是完成本工作所不可或缺的，在此表示 衷心的感谢。整个研究小组的这种团队合作精神也给了我极大的精神支柱，激发 了我的科研热情。感谢研究生期间大家一起走过的美好时光，收获的深厚情谊是 我一生的财富。 衷心感谢母亲、丈夫和家人的关心、支持和激励，他们的理解和支持永远是 我前进的动力和勇气。我能顺利完成学业，离不开他们不计回报的付出。 在博士研究生学业即将结束之际，回首过往，心中充满感恩，再次向所有关 心和帮助过我的老师、同学和亲人表示由衷的感谢，并祝福你们! 最后，向百忙之中抽出时间进行论文评阅和参加论文答辩的各位专家表示由 衷地感谢。 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 日U舌 前 言 急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上 皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤，造成弥漫性肺间质及肺泡水肿，导致的急性低 氧性呼吸功能不全。以肺容积减少、肺顺应性降低、通气／血流比例失调为病理生 理特征，临床上表现为进行性低氧血症和呼吸窘迫，肺部影像学上表现为非均一 性的渗出性病变，氧合指数(Pa02／Fi02)小 300mmHg，其发展至严重阶段 (Pa02／Fi02200 mmHg)被称为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)。基于不同疗效和预后，柏林会议上根据ARDS的时效性、胸片 影响和水肿来源重新定义了ARDS，并根据所需的最小呼气末正压和氧合指数 (Pa02／Fi02)将其分为轻、中、重三个阶段。200Pa02／Fi02300且PEEP或CPAP ／5cmH20者为轻度ARDS，即之前AECC定义的急性肺损伤。其发病机理主要由于 肺血管内皮细胞损伤、肺泡上皮细胞的损伤，以及肺泡内蛋白渗出和细胞碎片的 增加。脓毒症是一种宿主对感染反应失调导致的系统性炎症反应，进而发展为威 胁生命的器官功能紊乱，其最早出现的并发症即器官衰竭，而肺成为其首当其冲 受累的脏器。这种肺功能的紊乱难以在短时间内恢复、均需要呼吸机支持，进而 发展为ALI／ARDS。脓毒症导致的ALI／ARDS的治疗关键在于如何减少其发病率和 病死率，而目前的治疗方法均没有一个好的疗效，原因之一是缺乏有效阻止多条 通路引起的全身炎症反应综合症(SIRS)。如何改善脓毒症肺损伤预后成为当下研 究的热点和难点。 许多研究，包括我们团队发表的论文都已证实骨髓来源的间充质于细胞 (BM．MSC)和脂肪来源的间充质干细胞(Adipose—derived mesenchymal stem cells。 ASCs)在急性肺损伤模型中的治疗作用。MSC可旁分泌可溶性因子如角化细胞生 长因子、血管生成素一l和前列腺素．E。这些因子可以减轻炎症反应，保护肺血管内 皮细胞、肺泡上皮细胞，增加肺水肿的吸收以及抵抗细菌感染。我们小组先报道 II 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 日U舌 了最MSC在ARDS中的临床试验结果，我们发现MSC对ARDS的标志物SP．D有改 善作用。最近，MatthayN队报道了BM—MSC在ARDS的I期临床试验结果。 MSC作用于脓毒症肺损伤或ARDS的作用机制十分复杂，涉及多种不同的分 子、细胞和器官脏器。其中，巨噬细胞在MSC对脓毒症的发生发展中发挥着至关 重要的作用。Nemeth等通过氯膦酸盐去除循环的单核细胞，证明在TNF．C【的刺激下， BM—MSC通过介导PGE2通道改变常驻巨噬细胞，以增加其IL．10的分泌，减少炎症 反应，从而改善盲肠结扎穿刺引起的脓毒症。Ionescu等已证实MSC培养的上清液 (MSC—CdM)能增加抗炎M2巨噬细胞的生成从而减轻LPS诱导的肺损伤。 肺泡巨噬细胞