姜黄素衍生物C086抗肿瘤转移作用及对裸鼠移植瘤生长的影响-药理学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 2.4 Western-blot 检测C086对SGC-7901裸鼠异种移植瘤中蛋白含量的影响…29 2.5 Annxin-V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡………………………………………29 3 结果………………………………………………………………………………29 3.1 C086 对裸小鼠人胃癌细胞 SGC-7901 移植瘤生长的影响……………………30 3.2 Western-blot 检测 C086 对 SGC-7901 裸鼠异种移植瘤中蛋白含量的影响…32 3.3 Annxin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡………………………………………32 4 讨论………………………………………………………………………………33 5 小结………………………………………………………………………………35 结论…………………………………………………………………………………36 参考文献……………………………………………………………………………37 致谢………………………………………………………………………………41 综述…………………………………………………………………………………42 中文摘要 目的 对姜黄素衍生物 C086 体内外抗肿瘤侵袭转移作用研究，并对其抗肿瘤侵 袭转移机制进行初步研究，为 C086 体内外抗肿瘤作用提供依据。 方法 （1）采用采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测 C086 对胃癌细胞的增殖 抑制作用。（2）采用集落形成试验检测 C086 对胃癌细胞 SGC-7901 克隆原细胞 的抑制作用。（3）采取划痕实验方法和 Transwell 小室法检测 C086 对胃癌细胞 SGC-7901 迁移能力和侵袭能力的影响。（4）应用 Western blot 法检测 C086 处 理过的胃癌细胞 SGC-7901 中 MMP-2 和 MMP-9 中蛋白的含量。（5）建立小鼠 肝癌 H22 细胞腹水瘤肺转移模型，评价 C086 体内抗肿瘤转移活性。（6）建立裸 小鼠 SGC-7901 人胃癌细胞移植瘤模型，评价 C086 体内抗肿瘤生长活性。（7） Western-blot 检测 C086 对 SGC-7901 裸鼠异种移植瘤中 Erk1/2, C-Myc 和 Bcl-2 蛋白含量。（8）采用流式细胞仪检测 C086 对胃癌细胞 SGC-7901 凋亡的影响。 结果 （1）C086 对 SGC-7901 的增殖抑制作用表现出明显的量效和时效关系， C086 作用 48 h 和 72 h 后的 IC50 值分别是 5.29μg/mL 和 4.17μg/mL。（2）随着药 物浓度不断增加，集落形成抑制率逐渐升高，并表现出一定的剂量依赖性，半数 抑制浓度为 0.55μg/mL。（3）经过不同浓度 C086 处理细胞一定时间后，SGC-7901 细胞的侵袭能力和移动能力均低于对照组。2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL C086 的 侵袭抑制率分别达到了 50.65%、72.73%和 89.61%（P0.05）。（4）经过 C086 作用 24h 后的胃癌细胞 SGC-7901 中 MMP-2 和 MMP-9 的蛋白含量均有减少。 （5）C086 50mg/kg、C086 100mg/kg、C086 200mg/kg 口服每天给药后对小鼠 H22 肺转移的结节抑制率分别为 28.0%、41.5%和 59.7%。通过对肺组织切片 HE 染色观察，发现 C086 很好地保护了给药组的肺组织，使之受到癌细胞的侵袭较 少，抑制了肿瘤细胞的肺转移。（6）C086 微乳 100 mg/kg、150 mg/kg 口服每天 给药后对裸小鼠 SGC- 7901 人胃癌移植瘤的抑制率分别达到 52.3%，57.2%。（7） 免疫印迹结果显示，不同给药剂量的 C086 裸鼠不同瘤块组织中可见 Bcl-2、C-Myc 和 Erk1/2 蛋白含量均减少，并呈现一定的量效关系。（8）C086 能够诱导 SGC-7901 细胞中晚期和晚期凋亡。 结论 实验结果表明，C086 具有体内外抗肿瘤侵袭转移活性。 关键字 姜黄素衍生物 侵袭 划痕实验 肺转移 HE 染色 ABSTRACT Objective To provide the basis for the anti-tumor effect of curcumin derivative – C086 in vivo and in vitro.To explore the anti-tumor metastasis effect and the mechanism of its anti-tumor metastasis effect. Meth