降解秸秆微生物菌种的筛选及高效菌群的构建-环境科学专业论文.docxVIP

摘要为了获得高效降解纤维素的混合菌群，以解决秸秆类固废污染和秸秆资源有效利用 摘要 为了获得高效降解纤维素的混合菌群，以解决秸秆类固废污染和秸秆资源有效利用 的问题，本试验进行了纤维素降解菌的筛选及其降解效果研究。 高效纤维素降解菌群的筛选：采用刚果红纤维素琼脂平板培养基，从土壤样品中初 步筛选纤维素降解菌，对降解作用较好的菌株，再以内切酶(CMC)、纤维素全酶(FPA)、 外切酶(C1)和p-葡萄糖苷酶([3-Gase)4种酶活性指标进行复筛。对复筛获得的高效 菌株进行混合培养，分别测定比较组合菌群的CMC、FPA、C1和13-Gase 4种酶活性， 筛选出高效纤维素降解菌群。 产酶影响因素研究：将构建菌群ye．9／er．72／se．93接种于液体产酶培养基中，连续培 养7 d，测定不同时间、温度、pH、碳源和氮源条件下其酶活性。 菌群的纤维素降解能力测定：采用失重法和扫描电镜分析对菌群降解玉米秸秆的能 力进行试验研究。 菌种鉴定：对ye．9，er-72和se．93 3株菌进行形态鉴定以及分子鉴定。 通过上述实验得到以下结果： 高效纤维素降解菌群的筛选：筛选获得了y3、yi．7l、ye．9、er-72和se．93等5株活 性较高的纤维素降解菌。对5株纤维素降解菌进行组合培养，得到1个最好组合 ye．9／er-72／se．93，其CMC、FPA、CI和13-Gase 4种酶活分别为3．18，1．67，1．08和1．12 U／mL，均比单菌株时有一定程度提高。 产酶影响因素研究：结果显示，该菌群最适产酶时间是第4 d，最适产酶温度是40℃， 最适产酶pH值是7．5，最适产酶碳源为玉米秸秆，最适产酶氮源为NaN03。 高效降解菌群的纤维素降解能力测定：到第8 d培养结束时纤维素降低了24．07％， 半纤维素降低了28．31％，木质素降低了18．39％。通过比较电镜扫描图片可以看出菌群 ye．9／er-72／se．93对玉米秸秆的降解能力强于单菌株。 菌种鉴定：ye．9为链霉菌属的鲤链霉菌(Streptomyces carpaticus)，er-72为灰略 红链霉菌(Streptomyces griseorubens)，se．93为娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)。 混合菌群纤维素降解效果高于单一菌株，本试验为微生物混合培养降解纤维素提供 理论基础。 关键词：纤维素，放线菌，混合菌群，纤维素酶活性，鉴定 AbstractIn Abstract In order to resolve the problem that caused by the straw waste and make full use of the crop straw,the cellulose—degrading microbial community was expected to be obtained and its effects on straw degradation were studied． Screening of microbial community：Cellulose congo．red culture medium was used for screening soil samples，and then CMC，FPA，C I and p-Gase were used for re—screening．by which the strains with high capacity were obtained．The strains were mixed cultured，and a microbial community with high capacity was screened． Study of factors affecting microbial community fennetation：We studied various factors affecting microbial community liquid-state fermetation including different time，temperature， pH values，C resources and N resources in fixed time every day． Determination of ye··9／er-72／se--93：We studied the ability of com straw degradation of ye·9／er-72／se-93 by using weight loss method and SEM pictures． Strains identification：