姜黄素联合奥沙利铂对人胃癌细胞生长及其XIAP表达的影响-外科学(普外)专业论文.docxVIP

温州医学院硕士学位论文缩略词 温州医学院硕士学位论文 缩略词 简写 英文 中文 DAB Diaminobenzidine 二氨基联苯胺 DEPC diethylprocarbonate 二乙基焦碳酸酯 DMSO dimethyl sulphoxi de 二甲基亚砜 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 MTT methyl thiazolyl tetrazol ium 四甲基噻唑蓝 OD optical density 光密度值 PBS Phosphate Buffered Sal ine 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 多聚酶链反应 PI Propidium Iodide 碘化丙啶 ●，．) RT reverse transcr ipt i on 逆转录反应 SABC Strept Avidin—。Biotin Complex 链霉亲和素一生物素一 酶复合物 X—’linked Inhibitor of Apoptosis XIAP X连锁凋亡抑制蛋白 Protein cDNA compl ementary DNA 互补DNA mRNA messenger ribonucleic acid 信使RNA pNA 矿Nitroaniline 4一硝基苯胺 0 3 t-，。；，． 3 温州医学院硕士学位论文姜黄素联合奥沙利铂对人胃癌细胞生长 温州医学院硕士学位论文 姜黄素联合奥沙利铂对人胃癌细胞生长 及其XIAP表达的影响 研究生：胡金喜 导师：郑志强 中文摘要 目的： 1．研究姜黄素、奥沙利铂单用及联合作用对人胃癌SGC-7901细胞生长抑制、 凋亡诱导情况。 2．研究姜黄素、奥沙利铂单用及联合作用对人胃癌$6C-7901细胞中X连锁凋 ’ 亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响。 ) 3．研究姜黄素、奥沙利铂单用及联合作用对人胃癌SGC一7901细胞中Caspase-3 活性的影响。 方法： 1．采用MTT法检测不同浓度的姜黄素(0 IJ mol／L、2．5 u mol／L、5 p mol／L、 lOu mol／L、20u mol／L、40Il mol／L)、奥沙利铂(0Il mol／L、1．25IJ mol／L、 2．5 u mol／L、5 Il mol／L、10 II mol／L、20 u mol／L)单用及联合作用24h、48h、 72h后胃癌SGC-7901细胞的增殖情况。 2．采用流式细胞术(Annexin V-FITC／PI双染法)检测20 u mol／L的姜黄素、 ·》 10 IJ mol／L的奥沙利铂单用及联合作用48h后胃癌SGC一7901细胞的凋亡率。 ， 3．采用荧光显微镜(Hoechst33258染色法)观察20 u mol／L的姜黄素、10 Ii mol／L 争 的奥沙利铂单用及联合作用48h后胃癌SGC一7901细胞凋亡的形态学改变。 4．采用实时荧光定量RT—PCR检测20 u mol／L的姜黄素、10 Il mol／L的奥沙利铂 单用及联合作用48h对胃癌SGC一7901细胞中凋亡相关基因XIAP mRNA表达的 变化。 5．采用免疫细胞化学方法检测20 u mol／L的姜黄素、10 u mol／L的奥沙利铂单 用及联合作用48h对胃癌SGC一7901细胞中凋亡相关蛋白XIAP表达的影响。 ， 6．采用分光光度法检测20 u mol／L的姜黄素、10 Il mol／L的奥沙利铂单用及联 合作用48h对胃癌SGC-7901细胞中Caspase-3活性的影响。 - 结果： 4 温州医学院硕士学位论文1．MTT法结果显示，不同浓度的姜黄素和奥沙利铂均能抑制胃癌SGC-7901细胞 温州医学院硕士学位论文 1．MTT法结果显示，不同浓度的姜黄素和奥沙利铂均能抑制胃癌SGC-7901细胞 ’ 的增殖，呈现浓度和时间依赖性，随着药物浓度的增加或作用时间的延长， 抑制率逐渐增加。联合作用组的抑制率显著高于姜黄素组和奥沙利铂组(均 々。| 尺O．01)。 2．流式细胞术(Annexin V-FITC／PI双染法)结果显示，姜黄素和奥沙利铂均 能诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡，联合作用组的细胞凋亡率显著高于姜黄素组 和奥沙利铂组(均尺O．01)‘。 3．荧光显微镜(Hoechst33258染色法)发现，姜黄素组、奥沙利铂组、联合作 用组中胃癌SGC-7901细胞出现不同程度的凋亡形态学改变，部分细胞的细胞 核或细胞质内可见致