姜黄素联合伊马替尼对脊索瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制初步分析-临床医学(外科学)专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 论文题目 姜黄素联合伊马替尼对脊索瘤细胞增殖 和凋亡的影响及机制初步研究 论文作者签名: 指导教师签名: 论 文 评 阅 人 1 ：王锡阳，教授，博导，中南大学湘雅医院 评阅人 2：黄象望，教授，硕导，湖南省人民医院 评阅人 3： 答辩委员会主席： 李康华，教授，博导，中南大学湘雅医院 委员 1： 张朝跃，教授，博导，中南大学湘雅三医院 委员 2： 刘社庭，副教授，硕导，郴州市第一人民医院 委员 3： 易伟宏，副教授，硕导，深圳市南山医院 委员 4： 肖东民，教授，硕导，永州市中心医院 委员 5： 委员 6： 答辩日期：2015 年 05 月 17 日 南华大学学位论文原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包 含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的 学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论 文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 年 月 日 南华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文是本人在南华大学攻读 （博/硕）士学位期间在导师指导 下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得 以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的 全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国 家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士 学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》 规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中 国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学 位论文，解密后适用该授权。 作者签名： 导师签名： 年 月 日 年 月 日 姜黄素联合伊马替尼对脊索瘤细胞增殖和凋亡的 影响及机制初步研究 研究生：段波 导师：宋西正 中 文 摘 要 目的 观察姜黄素联合伊马替尼对脊索瘤细胞增殖和凋亡的影响，并初 步探讨其作用机制。 方法 体外培养脊索瘤细胞系 CM-319，给予不同浓度的伊马替尼和 （或）姜黄素作用 24-72h，WST-1 检测细胞的增殖情况；实时定量 PCR 检测伊马替尼和（或）姜黄素作用 CM-319 细胞 24h 后血小板源 性生长因子受体-β（PDGFR-β） mRNA 的表达水平；Western blot 检 测 PDGFR-β、bcl-2、caspase-3 蛋白的表达以及 Akt 的磷酸化；流式 细胞术检测细胞凋亡。 结果 1、随着伊马替尼和姜黄素浓度的增加，各单药及两者联合使用对 CM-319 细胞的生长抑制作用逐渐加强。当两者联合使用对 CM-319 细胞存活率为 50%时，伊马替尼和姜黄素的联合系数为 0.86。 2、10μmol/L 姜黄素并不能下调 CM-319 细胞表达 PDGFR-β mRNA， 但可抑制 PDGFR-β 蛋白的表达，且随着其浓度的递增，mRNA 和蛋 I 白表达水平逐渐降低。1μmol/L 伊马替尼对 PDGFR-β mRNA 以及蛋 白表达无明显影响。当其联合 10μmol/L 姜黄素作用 24h 后，PDGFR-β mRNA 以及蛋白表达水平显著降低。 3、采用 1μmol/L 伊马替尼和 10μmol/L 姜黄素联合处理细胞后，磷酸 化 Akt 的水平显著降低。 4、单纯给予 1μmol/L 伊马替尼或 10μmol/L 姜黄素处理对 CM-319 细 胞凋亡无明显影响。给予 20μmol/L 姜黄素处理后，CM-319 细胞凋亡 有所增加，但给予 1μmol/L 伊马替尼和 10~20μmol/L 姜黄素共同作用 后，凋亡细胞比例显著增高。同时，caspase-3 的含量也显著增高，而 bcl-2 有所降低。 结论 1．伊马替尼联合姜黄素可抑制脊索瘤细胞增殖可能与下调 PDGFR- β的表达及抑制 PI3K/Akt 的磷酸化有关； 2．姜黄素联合伊马替尼促进 CM-319 细胞凋亡可能是通过降低 bcl-2， 并上调 caspase-3 的表达而实现的。 关键词：伊马替尼；姜黄素；脊索瘤 II PRIMARY STUDY OF THE EFFECT AND MECHANISM OF CURCUMIN AND IMATINIB ON THE PROLIFERATION AND APOPTOSIS OF CHORDOMA CELLS Postgraduate: Bo Dua