绞股蓝总皂甙对阿霉素致大鼠膈肌毒性的保护作用-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 绞股蓝总皂甙对阿霉素致大鼠膈肌毒性的保护作用 中 文 摘 要 目的：研究阿霉素（adriamycin, ADM)对大鼠膈肌的毒性作用及机制；探讨绞股蓝 总皂甙（gypenosides, GP）对阿霉素致大鼠膈肌毒性的保护作用。 方法：成年雄性Sprague-Dawley大鼠32只，随机分成4组，对照组（CON）,阿霉素 组(ADM), 阿霉素组+绞股蓝总皂甙低剂量组(ADM+L-GP）, 阿霉素组+绞股蓝总 皂甙高剂量组（ADM+H-GP），每组8只。除CON组外，其余各组给予阿霉素 2.0mg·kg-1腹腔注射，隔日1次，共6次，累计量达12mg·kg-1 ,复制阿霉素毒性的动 物模型。CON组腹腔注射等量的生理盐水。ADM+L-GP组和ADM+H-GP分别给予 绞股蓝总皂甙250mg·kg-1·d-1、500 mg·kg-1·d-1，灌胃，给药容量为10ml·kg-1，连续4 周, CON组和ADM组给予等量的纯净水。应用体外灌流大鼠膈肌条的方法，分别 测量其单收缩张力(Pt)、最大强直张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT)、 张力最大上升速率(+dT/dtmax）、张力最大下降速率(-dT/dtmax)、张力-频率曲线 (Force-frequence curve)及疲劳指数(FI)的变化；同时测定膈肌组织超氧化物歧化酶 （SOD)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、总一氧化氮合酶(con-NOS)和 诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、Na+-K+-ATP酶、 Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性及丙二 醛(MDA)含量；电镜观察膈肌组织超微结构的变化；流式细胞仪测定膈肌细胞凋 亡率的变化。 结果：1.大鼠体重和膈肌/体重比：ADM组、ADM+L-GP组和ADM+H-GP组大鼠明 显低于CON组(P﹤0.01)；ADM+L-GP组和ADM+H-GP组大鼠明显高于ADM组（P ﹤0.01,P﹤0.05）。2.大鼠膈肌的各项力学指标：单收缩张力、最大强直张力、张 力最大上升速率、张力最大下降速率与疲劳指数，ADM组明显低于CON组（P﹤ 0.01）,ADM+L-GP组和ADM+H-GP组均高于ADM组（P﹤0.05,P﹤0.01）；单收缩 的峰值收缩时间和半舒张时间，ADM组与CON组相比明显延长（P﹤0.01）， ADM+L-GP组和ADM+H-GP组与CON组均无差别。3.给予10、20、40、60、100 Hz 频率的方波电压刺激膈肌条，ADM组、ADM+L-GP组和ADM+H-GP组的张力明显 低于CON组，ADM+L-GP组和ADM+H-GP组较ADM组增大（P﹤0.05,P﹤0.01）。 4. 大鼠膈肌组织的SOD、LDH、SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性ADM 组明显低于CON组(P﹤0.01)，ADM+L-GP组和ADM+H-GP组均高于ADM组（P﹤ 0.05,P﹤0.01）；MDA含量、con-NOS和iNOS活性ADM组明显高于CON组(P﹤0.01)， ADM+L-GP组和ADM+H-GP组均低于ADM组(P﹤0.01)。5.透射电子显微镜显示膈 肌超微结构：ADM组大鼠膈肌肌丝紊乱、断裂，Z线不清或消失；线粒体数量减 少，水肿扩张，嵴模糊断裂，大量线粒体空泡化或囊泡化，有髓板样物形成；肌 浆网明显扩张。电镜显示绞股蓝总皂甙可减轻阿霉素导致的膈肌组织超微结构的 病理改变。6.流式细胞仪测定膈肌细胞凋亡率变化显示：ADM组膈肌细胞凋亡率 （ 32.23±0.95 ）％ 明 显 高 于 CON 组 （ 1.14±0.14 ） ％ (P ﹤ 0.01) ， ADM+L-GP 组 （20.98±1.28）％和ADM+H-GP组（13.13±0.52）％膈肌细胞凋亡率明显低于ADM 组(P﹤0.01)，但仍然高于CON组(P﹤0.01)。 结论：阿霉素损伤大鼠膈肌，导致膈肌收缩和舒张功能下降，其机理与阿霉素导 致膈肌抗氧化酶活性降低，自由基生成增多，脂质过氧化增加，线粒体损伤和功 能障碍及其酶活性降低，NOS、iNOS活性增强而催化生成NO的毒性作用及细胞凋 亡增加有关。绞股蓝总皂甙具有抗氧化应激作用、抑制脂质过氧化，减轻膈肌细 胞线粒体损伤作用，保护SDH、LDH、ATP酶活性，抑制NOS、iNOS活性，降低 细胞凋亡，改善膈肌收缩和舒张功能，对ADM致大鼠膈肌毒性具有保护作用。 关键词：阿霉素；绞股蓝总皂甙；膈肌；自由基；脂质过氧化；线粒体； 细胞凋亡 Protective Effect of Gypenosides on Adriamycin-Induced Diaphragm Toxicity in R